【摘 要】
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背景:犬尿氨酸转氨酶3（KAT3）能够催化犬尿氨酸到犬尿酸的转氨反应,已经被证实它与谷氨酰胺转氨酶L（GTL）和β-共轭半胱氨酸裂解酶2（CCBL2）是同一个蛋白。GTL已经从大鼠的肝脏中分离纯化出来,公认为是肝脏的谷氨酰胺转氨酶。然而由于KAT1和KAT3的底物和序列的高相似性,很难去研究区分每种酶的特异性和在组织中的定位。方法:本研究通过半定量（RT-PCR）和实时荧光定量PCR（real t
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背景:犬尿氨酸转氨酶3（KAT3）能够催化犬尿氨酸到犬尿酸的转氨反应,已经被证实它与谷氨酰胺转氨酶L（GTL）和β-共轭半胱氨酸裂解酶2（CCBL2）是同一个蛋白。GTL已经从大鼠的肝脏中分离纯化出来,公认为是肝脏的谷氨酰胺转氨酶。然而由于KAT1和KAT3的底物和序列的高相似性,很难去研究区分每种酶的特异性和在组织中的定位。方法:本研究通过半定量（RT-PCR）和实时荧光定量PCR（real time RT-PCR）来分析KAT3在小鼠肝脏和肾脏中的基因表达量,利用特异性抑制剂通过生化酶活性实验来探究KATs的转氨酶活性,使用纯化出来的KATs特异性抗体利用Western blotting技术来检测KATs在组织中的蛋白表达量。结果:本研究探究了小鼠KAT3的生化特性和在组织中的定位,结果发现KAT3在小鼠的肝脏和肾脏中都有分布,但是在肾脏中的表达量比肝脏中高。相对于KAT1来说,KAT3以吲哚-3-丙酮酸或草酰乙酸作为氨基受体,其谷氨酰胺转氨酶活性更高。结论:虽然小鼠KAT3一直被认为是肝脏中的转氨酶,其实也是肾脏中的主要的谷氨酰胺转氨酶。意义:KAT3是研究外源性物质对肾脏损害的一个关键酶,因此本项研究成果将为研究肾脏的外源性物质中毒机理提供参考。同时在其他动物中,KAT3/GTL/CCBL2的组织分布也有待进一步研究。
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