研究目的:探讨外周血中性粒细胞（NEUs）对基于全血培养的结核感染γ-干扰素（IFN-γ）释放试验（TB-IGRA）的影响及相关机制。研究方法:1、分别收集结核病患者和健康对照者的外周血,采用流式细胞术检测两组研究对象全血中NEUs的比例和NEUs上PD-L1的表达。2、纳入结核病患者作为研究对象,采集外周血进行基于全血培养的TB-IGRA检测,分析NEUs比例及NEUs上PD-L1表达与TB-IGRA结果的相关性。3、根据NEUs比例将结核病患者分为高NEU组和低NEU组,分析两组患者TB-IGRA检测获得的IFN-γ浓度的差异,探讨NEU数量与结核分枝杆菌感染患者T细胞分泌能力的关系。4、选择临床结核病疑似患者,收集患者的基本信息和临床资料,同时采集外周血按如下分组进行检测:（1）T-SPOT组:直接进行T-SPOT.TB检测;（2）IGRA组:直接进行TB-IGRA检测;（3）NEUs去除组:采用免疫磁珠正选法去除外周血中的NEU后再进行TB-IGRA检测;（4）NEUs富集组:采用免疫磁珠负选法分离纯化外周血中的NEUs,将纯化获得的NEUs加入同一个体来源的另一份外周血中,再进行TB-IGRA检测。（5）PD-L1阻断组:在患者外周血中加入抗PD-L1的特异性单抗,再进行TB-IGRA检测。以患者的病原学诊断或最终的临床诊断为标准,分析各组TB-IGRA的检测敏感性和特异性。研究结果:1、与健康对照者比较,结核病患者外周血NEUs的比例显著高于健康对照组（76.54%vs 62.37%,P=0.0015）,外周血NEUs的数量也显著高于健康对照组（7.82 vs 3.98,P＜0.0001）;结核病患者外周血NEUs表面PD-L1的表达阳性率显著高于健康对照组（37.5%vs 14.4%,P＜0.001）,结核病患者外周血NEUs表面PD-L1平均荧光强度显著高于健康对照组（2972.93±1292.74 vs 1969.99±391.28,P=0.016）。2、结核病患者TB-IGRA检测的IFN-γ浓度与外周血中NEUs的比例呈负相关（R=-0.482,P=0.0017）,但与NEUs的绝对数量无显著相关性（R=-0.08,P=0.63）;与淋巴细胞的比例（R=0.386,P=0.0057）和数量（R=0.4055,P=0.0052）均呈正相关。3、结核病患者TB-IGRA检测的IFN-γ浓度与PD-L1阳性NEUs的比例呈负相关（R=-0.364,P=0.025）,与NEUs表面PD-L1的表达强度也呈负相关（R=0.394,P=0.0256）。4、高NEUs比例结核病患者IGRA检测的IFN-γ浓度显著低于低NEUs比例组（1.06±1.06IU/ml vs 2.69±2.63IU/ml,P＜0.01）;高NEUs比例结核病患者外周血淋巴细胞的比例显著低于低NEUs组（29.33%vs 11.66%,P＜0.0001）。5、去除结核病患者外周血中的中性粒细胞后,IGRA检测的IFN-γ浓度显著低于未处理组（1.13±0.23IU/ml vs 1.98±0.34 IU/ml,P＜0.001）,加入NEUs组的IFN-γ浓度显著高于未处理组（3.29±0.44IU/ml vs 1.98±0.34 IU/ml,P＜0.001）,PD-L1阻断组IGRA检测的IFN-γ水平3.27±0.34IU/ml显著高于未处理组（P＜0.001）,PD-L1阻断组IFN-γ浓度与加入NEUs组IFN-γ浓度比较差异无统计学意义。6、对73例结核病患者及既往结核病感染者进行的检测发现,T-SPOT.TB、TB-IGRA、PDL1 block-IGRA、Add-NEUs-IGRA、Del-NEUs-IGRA检测的阳性率分别是84.9%、69%、91.8%、87.3%、55%;T-SPOT.TB检测、TB-IGRA、PDL1-IGRA、Add-NEUs-IGRA、Del-NEUs-IGRA在51名Active TB患者检出率分别是81%、71%、94%、87.9%、52.4%,特异性分别是60.4%、76%、61.1%、58.1%、71.1%。结论:1、结核病患者外周血中性粒细胞比例与TB-IGRA检测中IFN-γ浓度呈负相关,且NEUs上PD-L1阳性率与IFN-γ浓度呈负相关,但去除外周血中NEUs后T淋巴细胞分泌IFN-γ分浓度下降,加入外源性NEUs后T淋巴细胞分泌IFN-γ浓度升高,加入PD-L1阻断剂后IFN-γ浓度明显升高。2、加入PD-L1后TB-IGRA结果在结核杆菌感染患者和活动性结核病患者的灵敏度都明显升高（91.8%、94%VS 69%、71%）,特异度也高于T-SPOT.TB检测,这一发现希望能解决TB-IGRA检测灵敏度低的缺点,特别是在活动性结核病的诊断中。