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【目的】研究肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor ,HGF)对体外培养的人晶状体上皮细胞(human lens epithelial cells ,hLECs)促增生及促移行的作用,初步探讨HGF在后发性白内障(posterior capsule opacification, PCO)中可能存在的机制,为PCO的临床治疗及预防提供新的依据。【方法】1.取人晶状体上皮细胞株(hLECs—B3)进行传代培养,通过细胞形态学及免疫组化染色法进行鉴定后,取3-5代细胞用于实验。2.噻唑盐比色实验(MTT法)测定细胞的增生情况:(1)取第3代传代培养的hLECs,分别加入不同浓度的HGF(2.5,5,10,20,40,50,100μg/L),24h后MTT法测定细胞的增生情况;(2)选择能极显著促进hLECs增生的HGF浓度(20μg/L),MTT法测定该浓度的HGF作用不同时间(6,12,24,48h)后hLECs的增生情况。3.流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测细胞周期:选择能极显著促进hLECs增生的HGF浓度(20μg/L),FCM检测该浓度的HGF作用24 h后hLECs细胞周期的改变。4.细胞损伤愈合模型测定细胞的移行情况:对已融合的6孔培养板中的细胞进行划线,用不同浓度的HGF(10,20,50μg/L)进行干预,24小时后细胞计数法计数进入裸露区的细胞,判定细胞的移行效应。5.采用HMIAS-2000医学图文分析系统采集、处理图像和应用SPSS13.0软件进行统计分析,探讨HGF对hLECs增殖及移行的影响。【结果】1.根据细胞的生长特性,形态学特征及波形蛋白、角蛋白免疫组化染色阳性等确定细胞为hLECs。2.MTT法:(1)HGF浓度为10,20,40,50μg/L时,24h后细胞吸光度分别为0.179±0.011,0.211±0.010,0.208±0.007,0.180±0.009与阴性对照组0.162±0.028相比,差异有显著性(P<0.05或P<0.01),增生率分别为10.5﹪,30.2﹪,28.3﹪,11.1﹪,其中浓度为20μg/L时具有最大促增生效应;(2)20μg/L的HGF作用时间为12h,24h时与阴性对照组相比,差异有显著性(P<0.05或P<0.01)。HGF对hLECs促增生效应在一定范围内呈剂量-时间依赖关系。3.流式细胞仪分析:20μg/L的HGF作用24小时后,与阴性对照组相比,实验组hLECs细胞周期发生明显改变,差异有显著性(P<0.05),表现为G0/G1期细胞显著减少,S期和G2/M期细胞增多。4.细胞损伤愈合模型:HGF浓度为10,20,50μg/L时,24h后移行的细胞数分别为10.583±1.594,13.667±1.080,26.750±2.092与阴性对照组8.667±1.080相比,差异有显著性(P<0.05或P<0.01),其移行能力分别为22.1%,57.7%,208.6%。HGF对hLECs促移行效应呈剂量依赖关系。【结论】HGF可促进hLECs的增生和移行,是hLECs的有丝分裂原和强有力的促移行因子,参与PCO的发生与发展。