水稻矮缩病毒基因组的克隆表达及hpRNA介导的抗水稻矮缩病毒的研究

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基因沉默是一种植物自然的抗病毒机制.植物病毒的侵染之所以致病,是因为该病毒编码了抑制基因沉默的蛋白(suppressor).水稻矮缩病毒(RDV)是植物呼肠孤病毒,基因组为双链RNA,共由12个片段组成.RDV能够侵染水稻并造成严重危害.设计了11对特异引物,用RT-PCR法从福建农科院提供的RDV病毒中克隆到了除S1以外的11个片段,并边接到pGEM-T easy或pMD18-T上进行了序列分析.将所得到的RDV-S6的序列与日本流行株系相比,核酸同源性为97.1﹪,编码氨基酸的同源性为98.8﹪.将S6克隆到pGEX-6P-1载体上表达S6融合蛋白.用所制备的蛋白免疫家兔,获得效价为1:3000的抗血清,能够特异性的检测感染RDV的水稻植株.
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