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目的:研究姜黄素衍生物C086与紫杉醇作用于乳腺癌MCF-7细胞体内外抗肿瘤作用及其机理。
方法:1.四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测C086和TPX分别对人乳腺癌MCF-7细胞增殖的抑制作用；C086与TPX同时作用对人乳腺癌MCF-7细胞增殖的抑制作用，利用ComPusyn软件分析联合用药的协同作用。2.利用流式细胞仪检测C086联合TPX对人乳腺癌MCF-7细胞诱导凋亡的作用。3.Western blot法检测C086,TPX,C086联合TPX对人乳腺癌对AKT,p-AKT，ERK，p-ERK及凋亡信号通路蛋白的影响。4.研究C086联合TPX对人乳腺癌MCF-7细胞裸鼠皮下移植瘤的抗肿瘤作用。5.Western blot法检测C086，TPX，C086联合TPX对人乳腺癌组织中AKT，p-AKT，ERK，p-ERK及凋亡信号通路蛋白的影响。
结果:1.C086作用于MCF-7细胞的48h的IC50值为（2603±32）ng/mL,TPX作用48h的IC50值为（15.96±624）ng/mL；C086联合TPX的CI值为0＜0.5927±1.13＜1，提示两药具有显著的协同作用。2.C0861250ng/mL诱导MCF-7细胞的凋亡率为33.6%，TPX诱导MCF-7细胞的凋亡率为59.4%，两药联合诱导MCF-7细胞的凋亡率达90.7%。3.Western blot结果显示C086和低剂量TPX联合作用于人乳腺癌MCF-7细胞能降低p-AKT，p-ERK的表达水平，诱导线粒体凋亡通路的相关蛋白caspase-3,7,9，PARP蛋白的表达量。4.C086100mg/kgig/d316以及TPX1mg/kgiv/d316，10mg/kgiv/3d316对人乳腺癌MCF-7裸鼠移植瘤的体积抑制率分别为66.57%（p＜0.01），59.60%（p＜0.01），88.01%（p＜0.01），C086分别与TPX1mg/kg，10mg/kg联合对裸鼠人乳腺癌MCF-7移植瘤体积抑瘤率可达78.31%（p＜0.01），80.46%（p＜0.01），各组裸鼠体重均无明显下降。5.Western blot结果显示C086固体分散体和低剂量紫杉醇联合作用于人乳腺癌MCF-7裸鼠皮下移植瘤组织中能显著降低p-AKT，p-ERK的表达水平，诱导线粒体凋亡通路的相关蛋白caspase-3,7,9，PARP蛋白的表达量。
结论:1.C086对人乳腺癌MCF-7细胞具有较强的增殖抑制作用，并呈现剂量依赖性。2.C086与TPX同时联合应用，对人乳腺癌MCF-7细胞能产生显著的协同抗肿瘤作用，能促进对肿瘤细胞的增殖抑制、增强肿瘤细胞凋亡。3.在本文条件下，C086/TPX剂量比为100∶1时，体内外协同抗肿瘤作用最强，且毒性不增强。4.C086与TPX联合应用能产生显著的协同抗肿瘤作用的机理可能与二者协同抑制p-AKT、p-ERK的表达量、协同促进Cleaved-Caspase3、Cleaved-Caspase7、Cleaved-Caspase-9、Cleaved-PARP蛋白的表达量，从而产生增强细胞增殖抑制、增强细胞凋亡的协同抗肿瘤作用。
方法:1.四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测C086和TPX分别对人乳腺癌MCF-7细胞增殖的抑制作用；C086与TPX同时作用对人乳腺癌MCF-7细胞增殖的抑制作用，利用ComPusyn软件分析联合用药的协同作用。2.利用流式细胞仪检测C086联合TPX对人乳腺癌MCF-7细胞诱导凋亡的作用。3.Western blot法检测C086,TPX,C086联合TPX对人乳腺癌对AKT,p-AKT，ERK，p-ERK及凋亡信号通路蛋白的影响。4.研究C086联合TPX对人乳腺癌MCF-7细胞裸鼠皮下移植瘤的抗肿瘤作用。5.Western blot法检测C086，TPX，C086联合TPX对人乳腺癌组织中AKT，p-AKT，ERK，p-ERK及凋亡信号通路蛋白的影响。
结果:1.C086作用于MCF-7细胞的48h的IC50值为（2603±32）ng/mL,TPX作用48h的IC50值为（15.96±624）ng/mL；C086联合TPX的CI值为0＜0.5927±1.13＜1，提示两药具有显著的协同作用。2.C0861250ng/mL诱导MCF-7细胞的凋亡率为33.6%，TPX诱导MCF-7细胞的凋亡率为59.4%，两药联合诱导MCF-7细胞的凋亡率达90.7%。3.Western blot结果显示C086和低剂量TPX联合作用于人乳腺癌MCF-7细胞能降低p-AKT，p-ERK的表达水平，诱导线粒体凋亡通路的相关蛋白caspase-3,7,9，PARP蛋白的表达量。4.C086100mg/kgig/d316以及TPX1mg/kgiv/d316，10mg/kgiv/3d316对人乳腺癌MCF-7裸鼠移植瘤的体积抑制率分别为66.57%（p＜0.01），59.60%（p＜0.01），88.01%（p＜0.01），C086分别与TPX1mg/kg，10mg/kg联合对裸鼠人乳腺癌MCF-7移植瘤体积抑瘤率可达78.31%（p＜0.01），80.46%（p＜0.01），各组裸鼠体重均无明显下降。5.Western blot结果显示C086固体分散体和低剂量紫杉醇联合作用于人乳腺癌MCF-7裸鼠皮下移植瘤组织中能显著降低p-AKT，p-ERK的表达水平，诱导线粒体凋亡通路的相关蛋白caspase-3,7,9，PARP蛋白的表达量。
结论:1.C086对人乳腺癌MCF-7细胞具有较强的增殖抑制作用，并呈现剂量依赖性。2.C086与TPX同时联合应用，对人乳腺癌MCF-7细胞能产生显著的协同抗肿瘤作用，能促进对肿瘤细胞的增殖抑制、增强肿瘤细胞凋亡。3.在本文条件下，C086/TPX剂量比为100∶1时，体内外协同抗肿瘤作用最强，且毒性不增强。4.C086与TPX联合应用能产生显著的协同抗肿瘤作用的机理可能与二者协同抑制p-AKT、p-ERK的表达量、协同促进Cleaved-Caspase3、Cleaved-Caspase7、Cleaved-Caspase-9、Cleaved-PARP蛋白的表达量，从而产生增强细胞增殖抑制、增强细胞凋亡的协同抗肿瘤作用。