参附注射液源于古方“参附汤”，由红参、附子两味药物组成，主治元气大亏，阳气暴脱，手足厥冷，头晕气短。现代临床用于保护心肌缺血再灌注损伤，增强心脏收缩功能，抗心力衰竭和心律失常。为了提高参附注射液的质量标准，保证其安全用药，探明其药效物质基础，本文对参附注射液的化学成分进行了深入研究，并进行了部分活性研究。本文首先按照参附注射液的制备工艺，分别制备了处方药材红参的提取物和附子的提取物，并对其化学成分进行了分离与鉴定。结果从红参提取物中分离鉴定了十二种常见人参皂苷和十种稀有人参皂苷，它们分别是：人参皂苷Rg₁（ginsenoside Rg₁）、人参皂苷Re（ginsenoside Re）、人参皂苷Rf（ginsenoside Rf）、人参皂苷Rg（2ginsenosideRg₂）、人参皂苷Rb₁（ginsenoside Rb₁）、人参皂苷Rc（ginsenoside Rc）、人参皂苷Rb₂（ginsenoside Rb₂）、人参皂苷Rb₃（ginsenoside Rb₃）、人参皂苷Rd （ginsenoside Rd）、人参皂苷F₁（ginsenoside F₁）、人参皂苷F₃（ginsenoside F₃）、人参皂苷F₅（ginsenosideF₅）、人参皂苷Rk₁（ginsenoside Rk₁）、人参皂苷Rg₅（ginsenoside Rg₅）、人参皂苷Rk₃（ginsenoside Rk₃）、人参皂苷Rh₄（ginsenoside Rh₄）、人参皂苷Rg₆（ginsenoside Rg₆）、人参皂苷F₄（ginsenoside F₄）、人参皂苷Rg₃（ginsenoside Rg₃）、人参皂苷20（R）-Rg₃（ginsenoside20（R）-Rg₃）、人参皂苷Rh1（ginsenoside Rh₁）和人参皂苷20（R）-Rh₁（ginsenoside20（R）-Rh₁）。从附子提取物中分离鉴定了六种乌头类生物碱，它们分别是：苯甲酰脱氧乌头碱（benzoyldeoxyaconitine）、苯甲酰次乌头碱（benzoylhypaconitine）、苯甲酰乌头碱（benzoylaconitine）、苯甲酰新乌头碱（benzoylmesaconitine）、乌头原碱（aconine）和次乌头碱（hypaconine）。接着本文采用离子液体均匀提取技术结合高效液相色谱法对参附注射液中来自附子的生物碱类成分进行了分析研究，并测定了其中4种单酯型乌头碱：苯甲酰乌头碱（BA）、苯甲酰次乌头碱（BH）、苯甲酰新乌头碱（BM）和苯甲酰脱氧乌头碱（BD）的含量。通过优化离子液体用量，体系最佳pH值，提取时间以及盐浓度等实验条件，最终建立了采用0.058g的[C6Mim][BF4]和0.26g的NH₄PF₆作为提取剂，样品用量为5mL，提取时间为1min，pH为中性，盐浓度为50g·L^-1的分析方法。在此条件下测得4种单酯型乌头碱的检出限分别为45.5（BM），19.8（BA），26.3（BH）和12.2（BD）μg·L^-1。测定结果表明不同批号的参附注射液中4种单酯型乌头碱的含量分别约在0.2^-1.2μg·mL^-1（BM），0.2-0.3μg·mL^-1（BA），0.1-0.7μg·mL^-1（BH）和0.04-0.1μg·mL^-1（BD）的范围内。此方法具有富集效果好、快速、简便的优点，适宜于测定参附注射液中微量乌头碱的含量。本文采用固相萃取技术结合高效液相色谱法，对参附注射液中来自人参的皂苷类成分进行了分析研究，并测定了其中20种人参皂苷的含量，包括10种常见人参皂苷(人参皂苷Rg₁、Re、Rb₁、Rb₂、Rb₃、Rc、Rd、Rf、Rg₂、F₁和10种稀有人参皂苷（人参皂苷Rh₁、20（R）-Rh₁、Rk₃、Rh₄、Rg₆、F₄、Rg₃、20（R）-Rg₃、Rk1和Rg₅）。结果表明参附注射液中常见人参皂苷含量较稀有人参皂苷含量略大，且随着生产批号的不同，它们的含量分别约在85^-119（Rg₁）、58-89（Re）、28-31（Rf）、13^-15（Rg₂）、198-227（Rb₁）、97^-114（Rc）、50-64（Rb₂）、8^-14（Rb₃）、3-6（F1）、36-49（Rd）、27-42（Rh₁）、14-25（20（R）-Rh1）、3-6（Rg₆）、4-8（F4）、8^-11（Rk-3）、6^-11（Rh₄）、21-36（Rg₃）、16-30（20（R）-Rg₃）、8^-15（Rk₁）、12-20（Rg₅）μg·mL^-1范围内。本文还考察了三种含有红参的常用中药注射剂参附注射液、参麦注射液和生脉注射液中20种人参皂苷的含量差别。结果表明这三种注射液中无论是常见人参皂苷还是稀有人参皂苷，其总含量相差不大，但具体人参皂苷含量有差别。临床应用证明参附注射液对心肌缺血再灌注损伤具有确切的保护作用。为了探讨这种作用的物质基础与作用机制，本文以AAPH引发的人血红细胞溶血为实验模型，研究了参附注射液、参附注射液中的总皂苷、总生物碱、总皂苷与总生物碱的混合物、10种常见人参皂苷混合物、10种稀有人参皂苷混合物的抗溶血作用。结果表明，参附注射液具有最明显的抗溶血作用，证明其对心肌缺血再灌注损伤具有的保护作用可能与其清除自由基作用有关，且这种作用除了与其中含有的人参皂苷与生物碱有关外还与其他物质有关。另外参附注射液的抗溶血活性在浓度为10%时最为明显，当浓度增大或减小时，其抗溶血活性减弱甚至表现出促溶血活性，说明参附注射液的疗效可能与其临床用量有关。本文还研究了参附注射液中含有的20种人参皂苷单体的抗AAPH诱导人血红细溶血作用。结果表明，人参皂苷单体的抗溶血活性大小与其结构有密切联系。10种常见人参皂苷和3种稀有人参皂苷自身没有溶血作用且对AAPH诱导的人血红细胞溶血具有保护作用，其作用大小为Rf>20（R）-Rh₁>Rg₁>Rb₁>Rd>Rc>Re>Rh₁>Rg₂^Rb₃^F-1²0（R）-Rg₃>Rb₂；另外7种稀有人参皂苷自身就具有溶血作用，其溶血作用大小为Rg₃^Rk₁^Rg₅>Rg₆^F₄>Rk₃>Rh₄。