雷公藤红素对大鼠实验性牙髓炎抗炎作用的研究

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背景:牙髓炎发生于牙髓组织中,产生明显疼痛,影响病人的作息与生活。临床中大量国内外医生都选择用根管治疗术进行牙髓炎的治疗,但其远期可能会增加牙折的风险,因此,寻找新型药物疗法可能会成为新的研究方向,达到抑制牙髓炎症,从而保存活髓的目的。传统中药雷公藤红素是一种天然活性成分,具有抗肿瘤、抗炎和免疫抑制的作用。目前有研究表明在抑制炎症方面雷公藤红素有着显著的作用,但关于其在牙髓炎中是否能够同样起到抑制的效果还未曾有过报道。目的:确定SD大鼠急性牙髓炎模型的构建方法及探究雷公藤红素是否具有牙髓炎抑制作用。方法:1.将大鼠麻醉后,仰卧位固定。选择大鼠上颌左右第一磨牙进行不喷水状态下地钻磨,待到钻磨至透红点停止,选用尖锐探针将髓室顶刺穿。生理盐水棉球止血后,放置LPS小棉球,30min去除棉球并拭干开髓孔处。1、3、5天后处死,拔除上颌第一、二磨牙,进行HE染色以判断牙髓炎症状况,同时采用q RT-PCR检测牙髓中炎症因子TNF-α、IL-1β的表达水平。2.成功构建大鼠牙髓炎模型后,进行直接盖髓术治疗。将16只大鼠于上颌第一、二磨牙进行模型构建后立即进行直接盖髓术治疗。将大鼠随机分成4组,每组4只,分别为造模组、氢氧化钙处理组、雷公藤红素处理组、氢氧化钙+雷公藤红素混合药物处理组,直接盖髓后使用玻璃离子水门汀进行暂封。3.5天后处死大鼠,拔除上颌第一、二磨牙,随机选用部分离体牙进行HE染色,确定牙髓组织中的炎症情况,并根据半定量组织学评分标准对各组牙髓状态进行评估。将余牙分为2组,一组提取牙体组织中的RNA后,采用q RT-PCR检测组织中炎症因子TNF-α、IL-1β表达水平的变化。另一组提取牙体组织中的蛋白,并选用Western Blot进行NF-κB、NF-κB p65蛋白含量变化的测定。结果:1.开髓后直接放置LPS棉球后的牙髓组织中穿髓孔附近出现食物残渣堆积,牙髓细胞排列紊乱,炎性细胞增多,证明已成功构建SD大鼠急性牙髓炎模型。q RT-PCR检测结果显示造模组中炎症因子TNF-α、IL-1β的表达水平较对照组表达水平高。2.直接盖髓术后的牙髓组织HE染色结果中,均以髓角作为观察视野,造模组牙髓细胞排列紊乱,重度炎性细胞浸润,并伴有组织坏死;氢氧化钙组和雷公藤红素组中度炎性细胞浸润,并伴有血管扩张及空泡样组织等;氢氧化钙雷公藤红素组轻度炎性细胞浸润,无明显组织充血、坏死。半定量组织学评分结果显示混合药物组评分明显低于造模组,且差异具有统计学意义(P<0.05)。q RT-PCR检测结果显示直接盖髓后各处理组中炎症因子TNF-α、IL-1β的表达水平较造模组明显下降,差异具有统计学意义(P<0.05)。Western Blot检测结果显示混合药物组中NF-κB、NF-κB p65的蛋白含量较造模组降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:1.开髓术+LPS棉球放置法可以成功构建SD大鼠急性牙髓炎模型2.雷公藤红素对大鼠实验性牙髓炎具有抑制作用,其作用机制可能与雷公藤红素降低NF-κB、NF-κB p65有关。
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