母乳低聚糖(HMO)是一类结构多样化的低聚糖，它具有广泛的生物活性。HMO在母乳中含量非常丰富，但在牛奶和婴儿等乳制品中的含量极微甚至不存在。目前的研究表明，HMO除了能够为机体提供快速生长的营养之外，它还具有其他的一些生物学活性，如抑制病毒和细菌的生长，调节机体免疫器官，修饰细胞表面糖组分等。　　本实验中，我们介绍了通过“一锅双酶法”磷酸化低聚半乳糖(GOS)来高效生产HMO类似物的方法。将这种方法运用到生产上，可以大量合成HMO类似物并有望将其作为益生元添加到婴儿的乳制品中。NMCSS合成的CMP-Neu5Ac是反应体系的中间产物同时也是反应供体。待反应终止后，向磷酸化的GOS反应体系中加入碱性磷酸酶(PhoA)除去反应中的副产物CMP、少量的CMP-Neu5Ac和未完全反应的CTP，待这几种化合物完全降解为胞苷和磷酸后，通过丙烯酰胺凝胶柱对产物进行纯化。本实验利用三种唾液酸转移酶PmST1、Pd2，6ST和CstII合成三种不同的产物，2，3-，2，6-和2，3/8-唾液酸化的低聚半乳糖，这三种HMO类似物在唾液酸化的水平上和结构上也具有其特异性。随后本实验将纯化以后的三种产物做为唯一碳源，用于青春双歧杆菌ATCC15703和婴儿双歧杆菌ATCC15697这两种厌氧菌的发酵，婴儿双歧杆菌因其能够表达唾液酸酶NanH2可以很好的利用三种HMO类似物进行生长，而缺乏这种酶的青春双歧杆菌则不能利用任意一种产物。