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小麦(Triticum aestivu)是一种重要的粮食作物。为了适应多种非生物和生物胁迫对小麦产量的影响,多种多样的新品种应运而生。增加小麦的遗传变异的方法之一是体细胞杂交。它可以从其他的种或属引入新的特性。山羊草是小麦远缘族植物,它有一些可能对小麦有益的性状,特别是在抗病方面引起注意的农艺学特性。由于属间是杂交不相容的,获得这些属间杂种的唯一途径是原生质体融合和细胞杂交。本试验以小麦幼胚和山羊草的叶片为研究材料,选用了三种染料:用中性红,FDA和罗丹明B分别对其酶解出的原生质体进行染色,并分别观察1×106、5×106、1×107、5×107个/mL四个密度下原生质体染色后的融合率,最终确定最佳的处理组合。应用正交试验设计法研究了不同种类及浓度的渗透调节物质的PEG融合方法诱导属间原生质体的融合,测定不同水平的融合率,以得到最佳融合条件组合。结果表明:FDA染色小麦的胚,罗丹明B染色山羊草的叶片,最适酶解时间为4 h,最融合适密度为1×1 07个/mL。最佳融合液为:PEG6000体积分数(w/v)为25%,0.50 M的蔗糖,pH值为5.8。最佳洗液为5.5 mM CaCl2。5-氮杂胞苷(5-azaC)是一种DNA甲基化抑制剂,已广泛用于DNA去甲基化引起的植物表观遗传研究中,一些与甲基化水平低的相关稳定遗传的有益表观性状有其潜在的育种价值。CPPU是细胞分裂素类的一种非常重要的植物生长调节物质,具有促进细胞分裂、细胞扩大、延缓植物衰老等作用。目前CPPU已广泛应用于果树、瓜类蔬菜生产,但在小麦生产上应用的研究较少。为了探讨5-azaC和CPPU对不同时期小麦的影响,通过种子处理和叶面喷施的方式,并利用高效液相色谱等多种分析手段,全面研究了不同处理对衰老指标、小麦产量的影响,并从DNA甲基化的角度,进一步对5-azaC和CPPU提高小麦产量的机理作出了研究,主要研究结果如下:小麦种子经低浓度(5-500μM)5-azaC处理后,降低了DNA甲基化水平,均能诱导paksaylabgg、Taichung29和Taichung29*6/CarstensV三种小麦开花。1000μM的5-azaC处理使小麦幼苗在20 d后死亡。在开花期叶面喷施5-azaC后,能延缓衰老,使旗叶的DNA甲基化水平降低,提高了茎叶对籽粒的贡献率,使小麦籽粒中的蛋白质含量和面筋含量略有增加。CPPU可延缓旗叶的衰老,使旗叶的DNA甲基化水平降低,增加了单茎穗重,促进了有机物质向库的转运,使小麦籽粒中的蛋白质含量和面筋含量增加。