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培育高繁殖力山羊新品种是提高山羊养殖业经济效益最直接有效的方法。云上黑山羊作为云南省自主培育的黑山羊新品种具有繁殖力高的特点,然而,该性状的分子调控机制尚不明晰。因此,以多羔云上黑山羊品种为研究对象解析山羊高产羔数形成的分子调控机制具有重要意义。近年来,非编码RNA被发现广泛参与生物机体的生殖调控进程,属于在转录后发挥调控功能的一类RNA,而其参与高繁殖力性状形成的具体作用尚不完全清楚。探索非编码RNA在提高山羊繁殖力中的潜在作用机制,通过分子育种提高山羊产业的经济效益是畜牧业亟待解决的重要科学问题。1.通过云上黑山羊卵巢组织全转录组数据,针对云上黑山羊多羔性状,筛选出与山羊繁殖相关的重要候选基因SEMA4G。荧光定量实验结果显示,SEMA4G在云上黑山羊高产羔数组卵巢组织中的表达量显著高于低产羔组（P＜0.05）,趋势与测序数据一致;构建SEMA4G过表达及干扰载体,通过体外培养山羊卵巢颗粒细胞,进行过表达和干扰实验,细胞增殖因子定量实验结果显示,过表达SEMA4G显著提高增殖相关因子表达量（P＜0.05）,Western blot实验结果与定量结果保持一致;随后CCK-8和Ed U细胞增殖检测实验结果证明,过表达SEMA4G可促进卵巢颗粒细胞增殖（P＜0.05）;酶联免疫吸附实验（ELISA）结果显示,过表达SEMA4G显著提高颗粒细胞分泌雌二醇和孕酮浓度（P＜0.05）。本部分实验说明,SEMA4G可促进山羊颗粒细胞增殖。2.通过生物信息学整合分析发现,miR-363-5p可能与SEMA4G的3’UTR结合,表明二者可能存在调控关系。为了验证这一结果,首先,通过RT-q PCR对高低产云上黑山羊卵巢组织中miR-363-5p的表达量进行检测,结果显示miR-363-5p在高产组中的表达水平显著低于低产羔数组（P＜0.05）,与测序数据一致;双荧光素酶报告实验结果证明miR-363-5p与SEMA4G存在结合情况;随后合成miR-363-5p模拟物与抑制剂,进行细胞转染实验,定量实验结果显示过表达miR-363-5p显著抑制SEMA4G基因表达量,干扰miR-363-5p则显著提高SEMA4G基因表达量（P＜0.05）。增殖标志因子定量实验结果显示,过表达miR-363-5p显著降低增殖标志因子表达量,Western blot实验结果与定量结果保持一致（P＜0.05）;细胞增殖检测实验结果证明,过表达miR-363-5p抑制卵巢颗粒细胞增殖。本部分实验说明,miR-363-5p通过抑制SEMA4G的表达,从而抑制颗粒细胞的增殖。3.全转录组测序数据显示lnc＿001664是miR-363-5p的内源竞争性RNA（ce RNA）,云上黑山羊高低产卵巢组织定量结果显示,高产组中lnc＿001664的表达量显著高于低产组,这一表达趋势与测序结果一致（P＜0.05）;双荧光素酶报告实验结果证明miR-363-5p可以与lnc＿001664结合;构建lnc＿001664过表达和干扰质粒,分别转染颗粒细胞,定量结果显示过表达lnc＿001664显著抑制miR-363-5p表达水平,显著促进SEMA4G表达（P＜0.05）;干扰lnc＿001664则作用相反。增殖因子定量实验结果显示,过表达lnc＿001664显著增加增殖相关因子表达量,Western blot实验结果与定量结果一致（P＜0.05）;细胞增殖检测实验结果进一步证明,过表达lnc＿001664促进卵巢颗粒细胞增殖。本部分实验说明,lnc＿001664作为miR-363-5p的ce RNA,促进SEMA4G表达,从而促进颗粒细胞增殖。以上研究结果表明,山羊miR-363-5p可靶向结合SEMA4G和lnc＿001664。Lnc＿01664作为miR-363-5p的ce RNA竞争性的与其结合,上调SEMA4G的表达,促进卵泡颗粒细胞的增殖,从而调节卵泡发育过程,提高山羊繁殖力。本研究为解析山羊高繁殖力分子调控机制提供了新思路,为加快高繁殖力山羊育种工作提供一定理论基础。