【摘 要】
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PA2019NES是铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa,PA）野生菌株PA 2016NX1的工程菌株,其吩嗪类物质产量较野生菌株高44.4%,而吩嗪能有效抑制植物病原真菌并增强植物抗旱能力,很有农用开发前景。本实验通过测量不同处理的玉米整株鲜重等,判断铜绿假单胞菌对植株耐旱性能的影响,探究PA2016NX1和PA2019NES与玉米互作状态下其多拷贝phz R基因对六型分泌
【基金项目】
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广西创新驱动发展专项资金项目（桂科 AA20161002-2）；
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PA2019NES是铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa,PA）野生菌株PA 2016NX1的工程菌株,其吩嗪类物质产量较野生菌株高44.4%,而吩嗪能有效抑制植物病原真菌并增强植物抗旱能力,很有农用开发前景。本实验通过测量不同处理的玉米整株鲜重等,判断铜绿假单胞菌对植株耐旱性能的影响,探究PA2016NX1和PA2019NES与玉米互作状态下其多拷贝phz R基因对六型分泌系统（Type VI secretion system,T6SS）相关基因转录水平的影响从而判断PA2019NES利用价值。具体方法与结果如下:（1）采用干旱胁迫实验研究PA2019NES对玉米抗旱能力的影响,结果表明,无干旱胁迫培养21天后,与菌株互作的植株生长状态更好且差异显著（P＜0.05）;中度和重度干旱胁迫条件下,实验组植株的恢复情况较空白对照组植株的恢复情况更好,且差异显著（P＜0.05）;（2）通过液相色谱法检测PA2019NES与玉米互作8h、12 h、24 h、72 h后吩嗪-1-羧酸含量变化,数据表明,吩嗪-1-羧酸含量与互作时间成正比,证明在玉米根系分泌物的作用下,PA2019NES中的多拷贝phzR仍高效控制吩嗪类物质的合成;（3）利用平板分析法比较存在与不存在玉米根系分泌物时,PA2019NES蹭行运动（twitching）、泳动（swimming）和集群运动（swarming）能力变化,不存在玉米根系分泌物时,PA2016NX1和PA2019NES蹭行运动能力相似,PA2019NES游泳运动能力较强（P＜0.05）,集群运动能力较弱（P＜0.05）;存在玉米根系分泌物时,二者蹭行运动和游泳运动能力相似,PA2016NX1的集群运动能力高于PA2019NES（P＜0.05）;（4）以RT-qPCR法比较了PA2019NES与玉米互作前后六型分泌系统部分基因（Tss A、Tss B、Tss C、Tss F）的转录水平,结果显示,在浮游状态下,仅TssA、TssB和TssC的转录水平在PA2016NX1、PA2019NES之间存在显著差异（P＜0.05）,PA2019NES的表达水平低于PA2016NX1者;与玉米互作24 h时,浮游状态下PA2019NES四种基因Tss A、Tss B、Tss C和Tss F的表达水平皆高于PA2016NX1,且有显著性差异（P＜0.05）,72 h时PA2019NES者低于PA2016NX1的,且有显著性差异（P＜0.05）。综上,铜绿假单胞菌能有效提高植株的耐旱能力,phz R基因高表达条件下铜绿假单胞菌的吩嗪-1-羧酸分泌量显著增加（P＜0.05）,且玉米根系分泌物的存在会影响细菌运动性和T6SS相关基因的表达,但具体作用机制有待深入研究。
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