【摘 要】
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研究目的:视网膜色素上皮细胞功能障碍能够导致光感受器变性和视力丧失,并与人类常见的致盲性疾病相关,如年龄相关性黄斑变性(Age-related macular degeneration,AMD)等。Mic
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研究目的:视网膜色素上皮细胞功能障碍能够导致光感受器变性和视力丧失,并与人类常见的致盲性疾病相关,如年龄相关性黄斑变性(Age-related macular degeneration,AMD)等。MicroRNA对于维持RPE的发育、生理功能的维持是不可缺少的。本研究的目的是为了确定miR-204在AMD发病机制中的作用及潜在的机制,为将来各种视网膜退行性疾病的诊断和治疗提供新的思路。研究方法:运用同源重组的方法获得miR-204基因敲除小鼠,通过视网膜切片免疫荧光、蛋白免疫印迹实验和实时荧光定量实验检测蛋白和mRNA的表达,用组织平铺片、透射电镜和频域光学相干断层扫描研究视网膜形态结构。研究结果:荧光定量实验结果表明我们成功构建了miR-204敲除小鼠。免疫荧光、蛋白免疫印迹实验和实时荧光定量实验结果表明miR-204敲除小鼠RPE特征性蛋白表达下降,眼底照相出可见明显的白色沉着物。视网膜电图结果也显示了miR-204敲除小鼠暗适应振幅下降。另外,miR-204敲除小鼠的SD-OCT的结果显示出其光感受器椭圆体带缺失,透射电镜结果显示出RPE基底内褶结构异常。结论:本研究表明了miR-204在维持RPE屏障功能和神经视网膜发育中的重要性,miR-204敲除小鼠可作为研究AMD发病机制的良好模型。
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