第一部分CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞和Th1/Th2细胞在屋尘螨皮下特异性免疫治疗中的变化目的观察CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞（nTreg）与IFN-γ+CD4+T细胞/IL-4+CD4+T细胞（Th1/Th2细胞）以及细胞因子IL-5、IL-10、IL-17、IFN-γ和TNF-α在皮下屋尘螨特异性免疫治疗（HDM-SCIT）中的变化，探讨SCIT可能的作用机制。方法选取2011年12月至2013年12月在广州医科大学附属第一医院变态反应科接受HDM-SCIT的27例支气管哮喘（或伴变应性鼻炎）患者作为SIT组，其中男16例，女11例，平均年龄为（25.7±11.8）岁；接受药物治疗的21例未控制哮喘（或伴变应性鼻炎）患者作为未控制组，其中男13例，女8例，平均年龄为（32.2±13.2）岁；接受药物治疗的22例控制哮喘（或伴变应性鼻炎）患者作为控制组，其中男13例，女9例，平均年龄为（28.0±9.5）岁；再选取20例健康人作为健康对照组，男女各10例，平均年龄为（26.3±4.0）岁。对受试者进行过敏原皮试（SPT）、肺通气功能检查、支气管激发试验（BPT）、外周嗜酸性粒细胞（EOS）计数以及抽取外周静脉血测定屋尘螨特异性IgE（sIgE）、粉尘螨sIgE和总IgE（TIgE），采取静脉血外周单个核细胞（PBMC）做HDM提取液（25μg/ml）刺激培养,培养72小时之后利用流式细胞术检测CD4+CD25+Foxp3+T细胞以及CD4+IFN-γ+T/CD4+IL-4+T细胞占CD4+T细胞的百分数，并且提取培养上清液以测定IL-5、IL-10、IL-17、IFN-γ以及TNF-α浓度；同时对每一位病例组（未控制组和控制组）患者发放哮喘生命质量问卷（AQLQs）以评估病例组患者的生命质量水平。结果1.未控制组及控制组患者FEV1占预计值百分比（FEV1%预计值）显著低于健康对照组水平（p均<0.01），而SIT组FEV1%预计值与健康对照组差异无统计学意义（p>0.05）；SIT组、未控制组以及控制组存在气道反应性增高，但是SIT的气道反应性级别明显低于未控制组及控制组（p<0.001）。2. PBMC中nTreg细胞占CD4+T细胞百分比（nTreg%CD4+T细胞）在SIT组及健康对照组的水平较高，在未控制组及控制组中较低，但差异无统计学意义（p=0.219）；经HDM提取液刺激后的nTreg%CD4+T细胞，在SIT组中最高，其次为健康对照组，最低为未控制组，但四组比较差异无统计学意义（p=0.392）；与未刺激时的基础值比较,经HDM提取液刺激后的nTreg%CD4+T细胞在SIT组(p<0.001)、未控制组(p=0.007)、控制组(p=0.007)和健康对照组(p=0.014)均显著上升；而增幅在各组间差异无统计学意义（p=0.655）。3.未刺激和经HDM提取液刺激后的Th1细胞占CD4+T细胞百分比（Th1%CD4+T细胞）在SIT组、未控制组、控制组以及健康对照组间差异均无统计学意义，且四组经HDM提取液刺激后的Th1%CD4+T细胞与未刺激时的基础值比较，差异也均无统计学意义。4. SIT组以及未控制组患者的Th2细胞占CD4+T细胞百分比（Th2%CD4+T细胞）的基础值显著高于健康对照组（p=0.011，p=0.028），其余组间差异无统计学意义。经HDM提取液刺激后，则仅表现为未控制组高于健康对照组（p=0.03）。四组经HDM提取液刺激后的Th2%CD4+T细胞与基础值比较，只有SIT组的降低有统计学差异（p=0.008）。5.基础值比较，健康对照组Th1/Th2比例高于SIT组（p=0.004）、未控制组（p=0.044）和控制组（p=0.029）；而经HDM提取液刺激后四组间差异无统计学意义。四组经HDM提取液刺激后的Th1/Th2比例与基础值比较，SIT组以及控制组的差异有统计学意义（p=0.03，p=0.045）,其余两组差异无统计学意义。6.未刺激时，细胞因子水平表现为未控制组的IL-5以及IL-10水平显著高于SIT组（p=0.032，P=0.044）、控制组（p=0.01，p=0.003）和健康对照组（p=0.024，p=0.037）；而经HDM提取液刺激后，表现为IL-5、IL-10、IL-17和TNF-α在健康对照组显著低于SIT组、未控制组和控制组（p均<0.05）。未刺激时IL-17水平、IFN-γ和TNF-α水平以及经HDM提取液刺激后的IFN-γ水平在四组间比较差异无统计学意义。未刺激与经HDM提取液刺激后的组内比较表现为，SIT组IL-5、IL-10、IL-17、IFN-γ以及TNF-α5种细胞因子均显著上升（p均<0.01）；健康对照组则除了IFN-γ和TNF-α上升有统计学意义外（p均<0.01）,其余三种细胞因子无明显改变；未控制组的IL-5、IL-10以及IL-17有显著上升（p均<0.01），IFN-γ和TNF-α无显著改变；控制组除了IFN-γ无显著改变外，其余4种细胞因子均显著上升（p均<0.01）。7.在SIT组中，支气管激发试验阳性的患者的IL-17（经HDM提取液刺激后）水平显著高于支气管激发试验为阴性的患者(p=0.035)；经HDM提取液刺激后的IL-5水平与EOS绝对值（r=0.559，p=0.03）、TIgE呈正相关关系（r=0.685，p=0.005）；未刺激和经HDM提取液刺激后的nTreg%CD4+T细胞均与经HDM提取液刺激后的Th1%CD4+T细胞呈正相关关系；（r=0.597，p=0.013；r=0.485，p=0.048）。8.在病例组中（包括未控制组和控制组），FEV1%预计值与经HDM提取液刺激后IFN-γ的水平（r=0.483，p=0.019），IL-10经HDM提取液刺激后上升的幅度（r=0.378，p=0.047）以及Th1/Th2比例经HDM提取液刺激后上升的幅度（r=0.523，p=0.013）呈正相关关系；而哮喘生命质量评分则与nTreg%CD4+T细胞经HDM提取液刺激后上升的幅度呈正相关关系（r=0.539，p=0.007）。结论1. HDM-SCIT可改善HDM过敏性哮喘患者的FEV1%预计值，且可显著降低患者的气道反应性。2.哮喘患者存在Th1/Th2比例下降。3. HDM-SCIT可能通过降低Th2细胞水平，提高Th1/Th2比例，以发挥其临床效应。测定外周血中Th1/Th2比例及其对过敏原的反应能力可能预测HDM-SCIT的疗效。4.受过敏原刺激时，哮喘患者表现为IL-5、IL-10和IL-17大幅度增高，而健康对照主要表现为IFN-γ以及TNF-α水平上升。5.接受HDM-SCIT满1年可使nTreg水平接近健康对照组，随着治疗的持续，nTreg可能有上升趋势，但需进一步观察。第二部分皮下注射标准化屋尘螨变应原疫苗治疗支气管哮喘和（或）变应性鼻炎的速发不良反应目的分析应用标准化屋尘螨变应原对变应性哮喘和（或）变应性鼻炎进行皮下特异性免疫治疗的速发不良反应。方法回顾性记录广州医科大学附属第一医院变态反应科2004年11月至2012年5月对屋尘螨过敏的哮喘和（或）变应性鼻炎患者接受SCIT过程中出现的速发不良反应，并分析速发不良反应与注射剂量、患者年龄、性别、患病种类和变态反应程度的关系。结果1.研究共纳入462例患者，其中452例（97.8%）出现速发局部不良反应，153例（33.1%）出现速发全身不良反应；所有患者共接受15645针次皮下注射，其中8523针次（54.5%）出现速发局部不良反应，397针次（2.5%）出现速发全身不良反应。2.速发局部不良反应发生率随剂量增加而增高，而速发全身不良反应主要分布在剂量快速上升阶段（2000～80000SQU）。3.单纯哮喘及哮喘合并变应性鼻炎的速发不良反应（局部和全身）的发生率高于单纯变应性鼻炎（p<0.01）。4.儿童速发局部不良反应发生率高于成人（p<0.001），但速发全身不良反应的发生率在儿童及成人患者间差异无统计学意义（p>0.05）。5.儿童患者中，男性速发不良反应发生率（局部和全身）高于女性（p<0.01）；而在成人患者中，女性速发不良反应发生率（局部和全身）高于男性（p<0.01）。6.速发不良反应（局部和全身）的发生率随着屋尘螨sIgE级别的增高而升高（p<0.001）；在皮下注射过程中，出现速发全身不良反应者治疗前TIgE水平高于未发生速发全身不良反应者治疗前TIgE水平（p=0.048）。结论对屋尘螨过敏的哮喘和（或）变应性鼻炎患者进行标准化屋尘螨变应原的SCIT时，速发局部不良反应常见，而速发全身不良反应少见；哮喘和鼻炎合并哮喘、少年男性、成年女性及屋尘螨sIgE和TIgE水平较高时，速发不良反应的发生率增高，且随注射变应原剂量递增而存在增高趋势，剂量快速上升阶段应警惕严重不良反应的发生。全文结论1. SCIT对屋尘螨过敏的哮喘和（或）鼻炎患者有效且安全，但在剂量快速上升阶段需要警惕严重不良反应的发生。2.哮喘患者存在Th1/Th2比例下降。3. HDM-SCIT可能通过降低Th2细胞水平，提高Th1/Th2比例，以发挥其临床效应；测定外周血中Th1/Th2比例及其对过敏原的反应能力可能预测HDM-SCIT的疗效。4.受过敏原刺激时，哮喘患者表现为IL-5，IL-10和IL-17大幅度增高，而健康对照主要表现为IFN-γ以及TNF-α水平上升。5.接受HDM-SCIT满1年可使nTreg水平接近健康对照组，随着治疗的持续，nTreg可能有上升趋势，但需进一步观察。