饥饿胁迫和注射GSK4112对尼罗罗非鱼肝Nr1d1基因和自噬基因节律性表达的影响

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本研究选取我国重要的淡水水产养殖品种-尼罗罗非鱼为研究对象,通过短期饥饿胁迫和注射GSK4112对尼罗罗非鱼肝脏Nr1d1基因和自噬基因节律性表达的影响,探讨饥饿胁迫和自噬修复的可能调控机制。研究中采用实时荧光定量PCR技术(QRT-PCR)对尼罗罗非鱼肝脏中Nr1d1基因及自噬基因节律性表达测定,分析其节律性表达;采用透射电镜观察自噬体的数量和分析饥饿前后以及注射GSK4112前后自噬体数量的变化。研究的主要结果如下:1、在正常投喂情况(对照组)下,尼罗罗非鱼肝中Nr1d1基因和12个自噬基因中Becn1、Gabarapl、Atp6v1d、Bnip3lb、Map1lc3a、Map1lc3b、Map1lc3c均呈现出显著的昼夜节律性(p<0.30)。在正常投喂情况下尼罗罗非鱼肝脏细胞中,电镜观察发现有多个自噬体,说明正常投喂情况下尼罗罗非鱼肝脏发生自噬现象。这是由于自噬基因特异性表达于尼罗罗非鱼肝中的缘故。2、饥饿胁迫7d(实验组)前后肝Nr1d1基因和自噬基因的显著性差异、节律性、峰值相位、振幅和中值均有变化,说明饥饿改变了基因原有的生物节律;电镜观察到饥饿胁迫7d后尼罗罗非鱼肝脏组织自噬体的数量有所增加,这表明饥饿诱导了罗非鱼肝脏自噬的发生。3、注射生理盐水(对照组)和注射GSK4112(实验组)前后肝Nr1d1基因和自噬基因的显著性差异、节律性、峰值相位、振幅和中值均有变化,说明注射GSK4112改变了基因原有的生物节律;电镜观察到尼罗罗非鱼肝脏组织注射GSK4112后自噬体的数量有所减少,这表明GSK4112抑制了自噬的发生。我们从这些结果得出结论:饥饿胁迫和注射GSK4112会改变肝Nr1d1基因和自噬基因的显著性差异、节律性、峰值相位、振幅和中值;饥饿胁迫可诱导肝自噬,GSK4112可抑制肝自噬;短期饥饿胁迫和注射GSK4112可改变基因原有的生物节律,建立新的平衡。
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