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目的：
本研究通过火针联合加巴喷丁胶囊，与单纯加巴喷丁胶囊对照治疗带状疱疹后神经痛(Postherpetic neuralgia, PHN)，观察：(1)火针的临床疗效和安全性；(2)血清神经损伤诱导蛋白Ninjurin1(NINJ1)、Ninjurin2(NINJ2)水平与PHN疗效和安全性的相关性。并进一步通过动物实验观察火针干预PHN模型大鼠的疼痛行为学改变和背根神经节(Dorsal root ganglion, DRG)中PKA、TRPV1及其下游分子、NINJ1、NINJ2的表达水平，以探究火针治疗PHN的可能分子机制及NINJ1、NINJ2的参与机制。
方法：
本研究分为随机对照临床研究和动物实验两部分。在随机对照临床研究中，以PHN患者为观察对象，治疗组以火针联合加巴喷丁胶囊为干预措施，对照组为加巴喷丁胶囊口服。治疗前进行基线资料的收集，包括一般信息，主要结局指标：VAS评分，次要结局指标，包括：疼痛面积、神经病理性疼痛相关量表、痛觉超敏(ALL)和针刺阈值(PPT)检测，以及血清NINJ1、NINJ2水平。火针治疗为点刺疼痛部位及相应双侧夹脊穴，加巴喷丁胶囊口服采用逐日递增后维持治疗量的方式。治疗疗程为10天，治疗过程中记录患者每日加巴喷丁的用量及药物相关不良反应，治疗第5天时，进行VAS评分及量表的检测。治疗结束后，观察两组患者主要结局指标、次要结局指标和血清学指标的差异，进行疗效评价，并比较加巴喷丁的总量，以及药物相关不良反应的发生率，进行安全性评价，并对治疗前后的血清NINJ1、NINJ2水平进行组内比较和组间比较。此外，通过相关性和回归分析等方法，寻找包括血清NINJ含量在内的影响PHN有效性和安全性的因素及独立预测因子。
动物实验将45只大鼠随机分为空白组、模型组、溶剂组(假造模组)、火针组和加巴喷丁组(均为n=9)。采用树脂毒素(RTX)腹腔注射制备PHN大鼠模型，通过每3日测定一次机械缩足反射阈值(MWT)和热缩足反射潜伏期(TWL)，判断造模成功与否。造模成功后，火针组、加巴喷丁组分别给予相应干预措施，共治疗14天，治疗期间仍每3日进行一次疼痛行为学检测。治疗结束后，使用Westernblotting法检测各组大鼠第4-6腰椎DRG中蛋白激酶A(PKA)、辣椒素受体(TRPV1)、P物质(SP)、降钙素基因相关肽(CGRP)、谷氨酸(Glu)，以及NINJ1、NINJ2的表达水平，以探究火针对PHN大鼠的疼痛行为学、PKA/TRPV1分子通路及下游的神经递质，以及NINJ1、NINJ2表达的影响，对火针的镇痛机制进行初步探究。
结果：
1.临床研究结果如下：
(1)疗效比较：治疗结束后，主要结局指标组内比较，火针组、对照组治疗后VAS评分均低于治疗前，差异有统计学意义。组间比较，火针组VAS评分(3.06?1.948)低于对照组(3.31?2.095)，但差异无统计学意义(P＞0.05)。火针组总有效率90.32%高于对照组80.56%，差异无统计学意义(P＞0.05)。火针组治疗前后VAS差值△VAS(4.55?2.16)高于对照组(4.33?1.91)，差异无统计学意义(P＞0.05)。此外，第5天VAS评分组间比较，火针组(5.00?1.37)低于对照组(6.06?1.76)，差异有显著统计学意义(P＜0.01)。火针组VAS评分下降≧30%、50%的天数(4.50?2.365)、(6.40?1.930)少于对照组(6.46?2.333)、(8.43?1.879)，差异有显著统计学意义(P＜0.01)。
对于次要结局指标，疼痛面积、IDPain评分、LANSS评分、痛觉超敏(ALL)人数比例、针刺阈值(PPT)降低人数比例组内比较，治疗后均低于或少于治疗前，差异均有统计学意义(P＜0.05)，组间比较无统计学差异(P＞0.05)。对于加巴喷丁总量，火针组(10935.48?1207.076)低于对照组(11483.33?1384.300)，差异有统计学意义(P＜0.05)。在SF-36生活质量量表评分方面，对于第5天生理职能(RP)、躯体疼痛(BP)、社会功能(SF)、情感职能(RE)、火针组(58.87?20.96 ， 42.68?15.84 ， 52.02?23.30)均高于对照组(46.53?18.08，33.00?17.15，37.15?22.66)，差异有统计学意义(P＜0.05)。对于第5天、第11天精神健康(MH)，火针组(53.81?13.89， 75.74?18.70)高于对照组(43.56?19.33，66.22?19.01)，差异有统计学意义(P＜0.05)。此外，两组间社会功能(SF)评分、精神健康(MH)评分治疗前后差值，即△SF、△MH组间差异有统计学意义(P＜0.05)。
(2)安全性比较：火针组药物相关不良反应为22.6%，低于对照组63.9%，差异有统计学意义(P＜0.05)。
(3)血清学指标比较：组内比较，两组治疗后NINJ1水平均较治疗前降低，差异有显著统计学意义(P＜0.01)；两组治疗前后NINJ2水平均无组内差异(P＞0.05)。说明血清NINJ1降低可能提示疼痛缓解。组间比较，治疗后两组间NINJ1、NINJ2水平比较：差异均无统计学意义(P＞0.05)。相关性检验显示，NINJ1与NINJ2具有中度相关性，差异有显著统计学意义(P＜0.01)。治疗前的NINJ1、NINJ2含量均与治疗后VAS评分、△VAS、疗效等级(等级1为痊愈，等级4为无效)、VAS下降≧30%时间、加巴喷丁总量等级(等级1-4，总药量递减)具有中度相关性。此外，NINJ2还与药物相关不良反应成相关性(P＜0.01)。
(4)回归分析提示，治疗前血清NINJ2含量可能为疗效等级的一个潜在预测因子，回归系数有显著统计学意义(P＜0.01)。前驱痛和NINJ2含量可能为治疗后VAS评分的潜在预测因子，回归系数具有统计学意义(P＜0.05，P＜0.01)。同理，对于VAS评分下降≧30%天数而言，干预措施、治疗前NINJ2具有统计学意义(P＜0.01，P＜0.05)。
2.动物实验结果如下：
(1)RTX腹腔注射诱发了大鼠机械痛阈的下降和热痛阈的升高，并出现了机械-热痛阈的分离，与对照组相比P＜0.01，证明成功构建了PHN模型。
(2)火针作用后，PHN大鼠的机械痛阈升高、热痛阈降低，并呈持续变化趋势，与RTX组相比P＜0.05，差异有统计学意义。
(3)分子变化表明，RTX组的PKA、TRPV1、p-TRPV1降低，SP、CGRP、Glu、NINJ1、NINJ2升高，与对照组相比均有统计学差异(P＜0.01或P＜0.05)，而假造模组则无类似变化。火针组同加巴喷丁组类似，PKA、TRPV1、p-TRPV1较RTX组升高，SP、CGRP、Glu、NINJ1、NINJ2较RTX组降低，差异均有统计学意义(P＜0.01或P＜0.05)。
结论：
综上所述，火针联合加巴喷丁胶囊能显著缓解带状疱疹后神经痛的疼痛症状，与单用加巴喷丁胶囊相比，提高治疗效率，节约时间成本。同时能提高患者生活质量，在精神、情感健康方面尤为明显。此外，明显减少药物用量，节约经济成本，能减低药物相关不良反应的发生率，提高治疗安全性和可推广性。本研究发现，前驱痛的出现可能是影响疗效的一个危险因素，同时，PHN患者血清NINJ1、NINJ2含量越高，提示可能会疗效越好，疼痛缓解程度越大、速度越快，不良反应越少。且NINJ2含量可能可以作为PHN疗效的一个独立预测因子。治疗后血清NINJ降低提示疼痛缓解，可能可以作为疗效评价指标之一。火针在PHN治疗中镇痛机制的发挥可能与PKA/TRPV1通路有关，火针可以逆转RTX造模后PHN大鼠DRG中表达下降的PKA、TRPV1、p-TRPV1，并能使其下游的SP、CGRP、Glu降低，从而发挥神经保护和修复作用；而NINJ1、NINJ2也可能通过PKA/TRPV1通路参与火针的镇痛效应。
本研究通过火针联合加巴喷丁胶囊，与单纯加巴喷丁胶囊对照治疗带状疱疹后神经痛(Postherpetic neuralgia, PHN)，观察：(1)火针的临床疗效和安全性；(2)血清神经损伤诱导蛋白Ninjurin1(NINJ1)、Ninjurin2(NINJ2)水平与PHN疗效和安全性的相关性。并进一步通过动物实验观察火针干预PHN模型大鼠的疼痛行为学改变和背根神经节(Dorsal root ganglion, DRG)中PKA、TRPV1及其下游分子、NINJ1、NINJ2的表达水平，以探究火针治疗PHN的可能分子机制及NINJ1、NINJ2的参与机制。
方法：
本研究分为随机对照临床研究和动物实验两部分。在随机对照临床研究中，以PHN患者为观察对象，治疗组以火针联合加巴喷丁胶囊为干预措施，对照组为加巴喷丁胶囊口服。治疗前进行基线资料的收集，包括一般信息，主要结局指标：VAS评分，次要结局指标，包括：疼痛面积、神经病理性疼痛相关量表、痛觉超敏(ALL)和针刺阈值(PPT)检测，以及血清NINJ1、NINJ2水平。火针治疗为点刺疼痛部位及相应双侧夹脊穴，加巴喷丁胶囊口服采用逐日递增后维持治疗量的方式。治疗疗程为10天，治疗过程中记录患者每日加巴喷丁的用量及药物相关不良反应，治疗第5天时，进行VAS评分及量表的检测。治疗结束后，观察两组患者主要结局指标、次要结局指标和血清学指标的差异，进行疗效评价，并比较加巴喷丁的总量，以及药物相关不良反应的发生率，进行安全性评价，并对治疗前后的血清NINJ1、NINJ2水平进行组内比较和组间比较。此外，通过相关性和回归分析等方法，寻找包括血清NINJ含量在内的影响PHN有效性和安全性的因素及独立预测因子。
动物实验将45只大鼠随机分为空白组、模型组、溶剂组(假造模组)、火针组和加巴喷丁组(均为n=9)。采用树脂毒素(RTX)腹腔注射制备PHN大鼠模型，通过每3日测定一次机械缩足反射阈值(MWT)和热缩足反射潜伏期(TWL)，判断造模成功与否。造模成功后，火针组、加巴喷丁组分别给予相应干预措施，共治疗14天，治疗期间仍每3日进行一次疼痛行为学检测。治疗结束后，使用Westernblotting法检测各组大鼠第4-6腰椎DRG中蛋白激酶A(PKA)、辣椒素受体(TRPV1)、P物质(SP)、降钙素基因相关肽(CGRP)、谷氨酸(Glu)，以及NINJ1、NINJ2的表达水平，以探究火针对PHN大鼠的疼痛行为学、PKA/TRPV1分子通路及下游的神经递质，以及NINJ1、NINJ2表达的影响，对火针的镇痛机制进行初步探究。
结果：
1.临床研究结果如下：
(1)疗效比较：治疗结束后，主要结局指标组内比较，火针组、对照组治疗后VAS评分均低于治疗前，差异有统计学意义。组间比较，火针组VAS评分(3.06?1.948)低于对照组(3.31?2.095)，但差异无统计学意义(P＞0.05)。火针组总有效率90.32%高于对照组80.56%，差异无统计学意义(P＞0.05)。火针组治疗前后VAS差值△VAS(4.55?2.16)高于对照组(4.33?1.91)，差异无统计学意义(P＞0.05)。此外，第5天VAS评分组间比较，火针组(5.00?1.37)低于对照组(6.06?1.76)，差异有显著统计学意义(P＜0.01)。火针组VAS评分下降≧30%、50%的天数(4.50?2.365)、(6.40?1.930)少于对照组(6.46?2.333)、(8.43?1.879)，差异有显著统计学意义(P＜0.01)。
对于次要结局指标，疼痛面积、IDPain评分、LANSS评分、痛觉超敏(ALL)人数比例、针刺阈值(PPT)降低人数比例组内比较，治疗后均低于或少于治疗前，差异均有统计学意义(P＜0.05)，组间比较无统计学差异(P＞0.05)。对于加巴喷丁总量，火针组(10935.48?1207.076)低于对照组(11483.33?1384.300)，差异有统计学意义(P＜0.05)。在SF-36生活质量量表评分方面，对于第5天生理职能(RP)、躯体疼痛(BP)、社会功能(SF)、情感职能(RE)、火针组(58.87?20.96 ， 42.68?15.84 ， 52.02?23.30)均高于对照组(46.53?18.08，33.00?17.15，37.15?22.66)，差异有统计学意义(P＜0.05)。对于第5天、第11天精神健康(MH)，火针组(53.81?13.89， 75.74?18.70)高于对照组(43.56?19.33，66.22?19.01)，差异有统计学意义(P＜0.05)。此外，两组间社会功能(SF)评分、精神健康(MH)评分治疗前后差值，即△SF、△MH组间差异有统计学意义(P＜0.05)。
(2)安全性比较：火针组药物相关不良反应为22.6%，低于对照组63.9%，差异有统计学意义(P＜0.05)。
(3)血清学指标比较：组内比较，两组治疗后NINJ1水平均较治疗前降低，差异有显著统计学意义(P＜0.01)；两组治疗前后NINJ2水平均无组内差异(P＞0.05)。说明血清NINJ1降低可能提示疼痛缓解。组间比较，治疗后两组间NINJ1、NINJ2水平比较：差异均无统计学意义(P＞0.05)。相关性检验显示，NINJ1与NINJ2具有中度相关性，差异有显著统计学意义(P＜0.01)。治疗前的NINJ1、NINJ2含量均与治疗后VAS评分、△VAS、疗效等级(等级1为痊愈，等级4为无效)、VAS下降≧30%时间、加巴喷丁总量等级(等级1-4，总药量递减)具有中度相关性。此外，NINJ2还与药物相关不良反应成相关性(P＜0.01)。
(4)回归分析提示，治疗前血清NINJ2含量可能为疗效等级的一个潜在预测因子，回归系数有显著统计学意义(P＜0.01)。前驱痛和NINJ2含量可能为治疗后VAS评分的潜在预测因子，回归系数具有统计学意义(P＜0.05，P＜0.01)。同理，对于VAS评分下降≧30%天数而言，干预措施、治疗前NINJ2具有统计学意义(P＜0.01，P＜0.05)。
2.动物实验结果如下：
(1)RTX腹腔注射诱发了大鼠机械痛阈的下降和热痛阈的升高，并出现了机械-热痛阈的分离，与对照组相比P＜0.01，证明成功构建了PHN模型。
(2)火针作用后，PHN大鼠的机械痛阈升高、热痛阈降低，并呈持续变化趋势，与RTX组相比P＜0.05，差异有统计学意义。
(3)分子变化表明，RTX组的PKA、TRPV1、p-TRPV1降低，SP、CGRP、Glu、NINJ1、NINJ2升高，与对照组相比均有统计学差异(P＜0.01或P＜0.05)，而假造模组则无类似变化。火针组同加巴喷丁组类似，PKA、TRPV1、p-TRPV1较RTX组升高，SP、CGRP、Glu、NINJ1、NINJ2较RTX组降低，差异均有统计学意义(P＜0.01或P＜0.05)。
结论：
综上所述，火针联合加巴喷丁胶囊能显著缓解带状疱疹后神经痛的疼痛症状，与单用加巴喷丁胶囊相比，提高治疗效率，节约时间成本。同时能提高患者生活质量，在精神、情感健康方面尤为明显。此外，明显减少药物用量，节约经济成本，能减低药物相关不良反应的发生率，提高治疗安全性和可推广性。本研究发现，前驱痛的出现可能是影响疗效的一个危险因素，同时，PHN患者血清NINJ1、NINJ2含量越高，提示可能会疗效越好，疼痛缓解程度越大、速度越快，不良反应越少。且NINJ2含量可能可以作为PHN疗效的一个独立预测因子。治疗后血清NINJ降低提示疼痛缓解，可能可以作为疗效评价指标之一。火针在PHN治疗中镇痛机制的发挥可能与PKA/TRPV1通路有关，火针可以逆转RTX造模后PHN大鼠DRG中表达下降的PKA、TRPV1、p-TRPV1，并能使其下游的SP、CGRP、Glu降低，从而发挥神经保护和修复作用；而NINJ1、NINJ2也可能通过PKA/TRPV1通路参与火针的镇痛效应。