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果实大小是影响猕猴桃果实品质和价格的主要因素,生产上广泛利用氯吡苯脲(CPPU)调控猕猴桃等果实大小。CPPU处理可促进果实细胞分裂和扩增,加快果实膨大,这也与提高的果实库强有关。为探明猕猴桃果实库强调控与果实同化物卸载和代谢的关系,本论文以美味系猕猴桃‘海沃德’(Actinidia deliciosa‘Hayward’)为试材,以清水作为对照,于盛花后20 d采用50 mg/L的CPPU溶液浸蘸猕猴桃幼果,研究了CPPU处理后对猕猴桃库强的调控作用以及糖代谢的影响,并通过转录组分析了CPPU处理后对相关代谢基因表达的影响。同时构建了蔗糖卸载后调控的关键基因Md NINV1和Ad SUSY1的过表达和干扰载体,并利用农杆菌侵染法获得了相应猕猴桃转基因株系,进行了糖含量等指标测定,获得的主要研究结果如下:1.与对照相比,花后20 d利用50 mg/L的CPPU处理能有效增加海沃德猕猴桃果实单果质量,增加果实纵横径,且CPPU处理后果实大小增加幅度最大的是在处理后第一和第二周,即花后35天之前。对果实糖酸含量测定发现,CPPU处理后,果糖含量在处理后前3周无明显变化,在发育后期均高于同期对照组。而葡萄糖,蔗糖等含量在整个果实发育期均高于同期对照组。对糖代谢相关酶活性分析发现:CPPU处理的果实与对照果实相比,SPS(蔗糖磷酸合酶)活性整体升高,参与蔗糖裂解的蔗糖合酶(SUSY)和酸性转化酶(AINV)在果实发育前期高于对照,在发育后期低于对照。这些结果表明,CPPU处理后提高了果实的库强,增加了CHO分配,这可能与加快的蔗糖裂解相关。此外,CPPU处理的猕猴桃Vc含量在生长发育前期高于对照组,而发育后期低于对照组。对照果实和CPPU处理的果实还原型Vc和总Vc含量在整个果实生长发育期均呈现先上升后下降的变化规律。2.为进一步探明CPPU处理提高果实库强,促进果实生长的机制,利用RNA-seq技术分析了CPPU处理后前三周果实转录组的变化。结果表明,通过CPPU处理以后对糖代谢通路产生了影响,在碳水化合物代谢转运通路,CPPU处理上调了β-淀粉酶、α-葡聚糖磷酸化酶等淀粉代谢基因,在蔗糖卸载途径,CPPU处理上调了SUT,SPT,CWINV,SUSY,HXK等基因的表达水平,尤其与猕猴桃库强相关的SUSY1在CPPU处理后第7天有显著的上调,这可能与CPPU调控SUSY活性和库强有直接关系。同时对激素信号进行分析,发现差异基因主要集中在细胞分裂素的感知和信号转导,乙烯生物合成,乙烯感知和信号转导,赤霉素生物合成,赤霉素修饰和降解等途径,这些激素信号的变化可能与库强调控、蔗糖卸载能力及细胞分裂膨大等相关基因变化有关。3.为探明蔗糖裂解方式在猕猴桃蔗糖卸载中的作用,构建了苹果蔗糖主要裂解酶中性转移酶基因Md NINV1过表达载体和猕猴桃蔗糖裂解关键酶蔗糖合酶基因Ad SUSY1干扰载体,通过农杆菌侵染获得了‘海沃德’猕猴桃抗性株系,通过DNA和RNA水平分子检测,共获得了Md NINV1异源过量表达的3个阳性株系;同时获得了Ad SUSY1干扰的3个株系。对Md NINV1叶片糖含量测定发现,Md NINV1转基因猕猴桃叶片果糖,葡萄糖含量均低于野生型,其中果糖含量降低约50%,葡萄糖含量降低约30%,而蔗糖含量变化并不显著。对Ad SUSY1叶片糖含量测定发现,转基因株系蔗糖含量明显降低。