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目的:本研究主要准备观察5μmol/L、10μmol/L和20μmol/L的五味子乙素(schisandrin B,Sch B)对顺铂(cis-diamminedichloroplatinum,CDDP)诱导的人肾近曲小管上皮细胞(Human kedneyproxiamal tubular cells-2,HK-2)凋亡的保护作用,并进一步探讨其可能的作用机理。方法:将人肾近曲小管上皮细胞分为5组。对照组(ctrl组):对HK-2不做任何加药处理;顺铂组(CDDP组):在HK-2的培养基中加入终浓度为50μmol/L的顺铂孵育24小时;五味子乙素预保护组(CDDP+Sch B组):首先在HK-2培养基中分别加入终浓度为5μmol/L、10μmol/L和20μmol/L的五味子乙素预孵育2小时,之后再加入终浓度为50μmol/L的顺铂继续孵育24小时;CCK-8试剂盒检测三种不同浓度五味子乙素预处理后HK-2的活性;流式细胞仪检测三种不同浓度五味子乙素预处理后HK-2的凋亡率;三种不同浓度五味子乙素预处理后HK-2的细胞形态在倒置显微镜下观测;Western Blot检测各组HK-2中P21、Apaf-1和Caspase-3蛋白的表达;RT-PCR检测各组HK-2中Bcl-2 m RNA的表达;免疫荧光法检测三种不同浓度五味子乙素预处理后HK-2中P21的表达。结果:CCK-8实验结果显示,顺铂组与对照组比较HK-2活性显著下降,三种不同浓度Sch B预处理组较顺铂组HK-2活性增长,差异有统计学意义,呈剂量依赖性。10μmol/L和20μmol/LSch B预保护的HK-2活性较5μmol/LSch B预保护组更高;流式细胞仪检测HK-2凋亡率结果显示,顺铂组与对照组比较,凋亡率显著增长,三种不同浓度Sch B预处理组的凋亡率均较顺铂组增加,差异有统计学意义,呈剂量依赖性。10μmol/L和20μmol/LSch B预保护的HK-2凋亡率较5μmol/LSch B预保护组更低;倒置显微镜观察各组HK-2结果显示,正常的H K-2光镜下呈多边鹅卵石样,体积较大,细胞紧密连接,可见融合。顺铂组可见细胞体积明显缩小,相互连接消失。5μmol/L、10μmol/L、20μmol/L Sch B预保护组,镜下可见细胞形态的损伤明显减轻,体积略微缩小,相互间连接断裂减少;Western Blot检测各组HK-2结果表明,与对照组比较,顺铂组Apaf-1、cl eaved caspase-3蛋白表达量明显增加,P21蛋白表达量亦增加,Sch B预保护组A paf-1、cleaved caspase-3表达量较顺铂组减少,P21表达量较顺铂组增加,差异有统计学意义,呈剂量依赖性。10μmol/L和20μmol/LSch B预保护的HK-2中A paf-1、cleaved caspase-3蛋白表达量较5μmol/LSch B预保护组更低,P21表达量较5μmol/LSch B预保护组更高;RT-PCR检测各组HK-2结果表明,与对照组比较,顺铂组Bcl-2 m RNA表达量显著减少,Sch B预保护组Bcl-2 m RNA表达量较顺铂组增加,差异有统计学意义,呈剂量依赖性。10μmol/L和20μmol/L的Sch B预保护的HK-2中Bcl-2 m RNA表达量较5μmol/LSch B预保护组更高;免疫荧光实验结果显示,与对照组比较,顺铂组P21在细胞核内少量表达,呈点状分布,部分区域未见表达或缺失;Sch B预保护组P21在细胞核内表达量较顺铂组显著增强,以颗粒状分布于细胞核。结论:5μmol/L、10μmol/L和20μmol/L的Sch B对顺铂诱导的HK-2凋亡有保护作用,其机制可能与其上调Bcl-2和下调Apaf-1、Caspase-3的表达,阻碍线粒体途径的凋亡有关,还可能与其上调P21的表达,抑制细胞周期蛋白依赖性激酶有关,且其保护作用呈剂量依赖性,10μmol/L和20μmol/L的Sch B对HK-2凋亡的保护作用更明显。