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目的：采用四妙散含药血清干预尿酸诱导的人肾小管上皮细胞(HK-2)纤维化的模型,初步探讨四妙散抗肾间质纤维化的机理。方法：1.采用不同浓度尿酸溶液刺激人肾小管上皮细胞,观察形态学的改变,MTT检测尿酸对细胞活力的影响,RT-PCR检测细胞a-SMA, E-CadherinmRNA的表达,制备肾间质纤维化的模型。2.四妙散含药血清干预尿酸诱导的肾间质纤维化的模型,观察其对尿酸诱导的HK-2细胞形态影响,MTT法测定各组细胞增殖活力,RT-PCR检测各组细胞TGF-B1, a-SMA, E-CadherinmRNA的表达,免疫组化法检测各组细胞TGF-B1, a-SMA, E-Cadherin蛋白的表达。结果：1.形态学结果显示：正常组的人肾小管上皮细胞(HK-2)细胞呈现铺路石状,排列规整。模型组细胞数目的明显减少,细胞形态拉长,变为梭形。MTT结果显示24h的0.225mg/ml尿酸溶液能显著抑制人肾小管上皮细胞(HK-2)的活性(P<O.O1).RT-PCR显示,与正常组相比,模型组的a-SMAmRNA的表达升高,尤以24h的0.225mg/ml尿酸刺激组的升高显著(P<0.01)而模型组的E-CadherinmRNA的表达下降,尤以24h的0.225mg/ml尿酸刺激组的下降显著(P<0.01)。2.在加入四妙散含药血清干预后,随着药物浓度增加,贴壁细胞数目增加,形态逐渐由梭形变成铺路石样。MTT结果显示：四妙散含药血清能明显促进尿酸诱导的人肾小管上皮细胞(HK-2)细胞的活性,且呈现时间和剂量的依赖性,其中以24h高剂量的升高最为明显(P<O.O1).RT-PCR的结果显示：在加入含药血清干预24h后,a-SMAmRNA和TGF-B1mRNA的表达下降,尤以高剂量组下降显著(P<0.01)。而四妙散干预的E-CadherinmRNA表达升高,而E-CadherinmRNA表达升高,尤以高剂量组升高显著(P<0.01),和模型组相比,具有显著性差异(P<0.05)。免疫组化显示,a-SMA及TGF-B1蛋白的表达在正常组可见少量浅黄色阳性表达；模型组棕黄色阳性面积增多,部分区域呈深棕色,阳性表达强烈,其阳性目标总面积和IOD值明显升高,与正常组相比具有显著差异性(P<0.01)；在加入四妙散低、中、高剂量组,随着剂量的增加阳性表达面积明显减少,颜色变浅,四妙散含药血清低、中、高剂量组TGFB-B1阳性目标总面积和IOD值较模型组低(P<0.01),而高剂量组TGF-B1阳性目标总面积和IOD明显降低,具有显著性差异(P<0.01)。生理盐水组与模型组相比变化不大。E-Cadherin的蛋白的表达在正常组可见棕黄色阳性表达；模型组黄色阳性面积减少,棕黄色变浅,其阳性目标总面积和IOD值明显降低,与正常组相比具有显著差异性(P<0.01)；在加入四妙散的低、中、高剂量组,随着剂量的增加阳性表达面积增加,颜色逐渐变深,四妙散含药血清低、中、高剂量组E-Cadherin阳性目标总面积和IOD值较模型组升高(P<0.05),而高剂量组E-Cadherin阳性目标总面积和IOD明显升高,具有显著差异性(P<0.01)。生理盐水组与模型组相比,变化不大。结论：1.采用0.225mg/ml尿酸溶液刺激人肾小管上皮细胞(HK-2)24h,可以建立肾间质纤维化的细胞模型。2四妙散含药血清能明显改善尿酸诱导的HK-2细胞形态学改变,预防肾间质纤维化的发生。3四妙散下调尿酸诱导的纤维化模型的TGF-β1、α-SMA mRNA和蛋白的表达,上调E-Cadherin mRNA和蛋白的表达,可能是其预防肾间质纤维化的机制之一。