梗阻性黄疸大鼠肝切除术后胆汁丢失对肝功能及肝再生影响的实验研究

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目的:探讨梗阻性黄疸大鼠肝切除术后,胆汁丢失对肝功能及肝再生的影响,为临床应用提供理论依据。方法:1.动物分组:健康SD大鼠90只,随机分为3组:(1) SO(Sham operation假手术)组:无梗阻性黄疸大鼠肝脏切除组;(2)ID(Internal biliary drainage胆道内引流)组:梗阻性黄疸大鼠肝脏切除术后胆汁内引流组;(3)ED(External biliarydrainage胆道外引流)组:梗阻性黄疸大鼠肝脏切除术后胆汁外引流组。2.动物模型制备:(1)SO组:10%水合氯醛注射入大鼠腹腔麻醉,腹正中白线进腹,找到胆总管,予以翻动第一肝门后关腹。72h后,按原切口进腹,游离肝脏左叶,予以结扎左叶肝蒂切肝,肝切除术后关腹。(2)ID组:麻醉方法同上,腹正中白线进腹,找到胆总管,予以4-0丝线结扎胆总管后关腹,即制备OJ模型(ObstructionJaundice梗阻性黄疸)。72h后,按原切口进腹,游离左叶,予以结扎左肝蒂切肝,同时行胆肠内引流后关腹。(3) ED组:麻醉方法同上,腹正中白线进腹,找到胆总管,予以4-0丝线结扎后关腹,即制备OJ模型。72h后,按原切口进腹,游离左叶,予以结扎左肝蒂切肝,行胆道外引流后关腹。3.指标检测:每个时相取6只SD大鼠,各组分别在术后0h,24h,48h,72h,168h时间点,应用全自动生化分析仪检测血清总胆红素(TIBL)、谷草转氨酶(AST)、白蛋白(ALB);测定术后168h残肝重量/大鼠体重比率;残肝行HE染色,光镜下观察肝组织的有丝分裂情况,统计有丝分裂细胞数;免疫组化染色法检测肝切除术后PCNA(Proliferating cell nuclear antigen增殖细胞核抗原)的表达。结果:1.大鼠术后肝功能测定(1)无梗阻性黄疸的大鼠(部分肝脏切除组即SO组)与梗阻性黄疸大鼠(胆道内引流组即ID组和胆道外引流组即ED组)相比:术后0h,24h,48h,72h,168h时间点,SO组与ID组和ED组相比,TBIL明显低于后面两组, P<0.05,差异具有统计学意义;术后0h,24h,48h,72h时间点,SO组与ID组和ED组相比,AST明显低于后面两组,P<0.05,差异具有统计学意义;术后0h,24h,48h,72h,168h时间点, SO组与ID组和ED组相比,ALB明显高于后面两组,P<0.05,差异具有统计学意义。(2)梗阻性黄疸大鼠胆汁未丢失(胆道内引流组即ID组)与胆汁丢失(胆道外引流组即ED组)相比:术后0h,24h,48h,72h,168h时间点, ID组比ED组TBIL没有明显差异, P>0.05,差异不具有统计学意义;术后0h,24h,48h,72h,168h时间点,ID组比ED组AST低且下降较快,P<0.05,差异具有统计学意义;术后0h,24h,48h,72h,168h时间点,ID组比ED组ALB高且上升较快,P<0.05,差异具有统计学意义。2.大鼠术后肝再生功能评价(1)无梗阻性黄疸的大鼠(SO组)与梗阻性黄疸大鼠(ID组和ED组)相比:SO组对比ID组和ED组在术后168h的残肝重量/体重比值高,残肝增生明显,P<0.05,差异具有统计学意义;SO组对比ID组和ED组在术后24h、48h、72h时间点,核分裂相高,P<0.05,差异具有统计学意义;SO组对比ID组和ED组的PCNA峰值高,并且出现时间早,P<0.05,差异具有统计学意义。(2)梗阻性黄疸大鼠胆汁未丢失(ID组)与胆汁丢失(ED组)相比:ID组对比ED组在术后168h的残肝重量/体重比值高, P<0.05,差异具有统计学意义;ID组对比ED组在术后24h、48h、72h时间点,核分裂相高,P<0.05,差异具有统计学意义;ID组对比ED组在术后48h的时间点PCNA值高,峰值高,P<0.05,差异具有统计学意义。结论:(1)梗阻性黄疸可能抑制大鼠部分肝切除术后残余肝脏的再生。(2)梗阻性黄疸大鼠部分肝切除术后,胆汁丢失可能不利于术后肝功能的恢复和残余肝脏的再生。
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