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本试验以1,4-丁二醇二缩水甘油醚将半抗原与经过活化的载体蛋白牛血清白蛋白(cBSA)偶联,并运用琥珀酸酐法将半抗原与活化的卵清白蛋白(cOVA)进行偶联,分别制备出免疫抗原TBL-cBSA与包被抗原TBL-cOVA。紫外分光光度法及SDS-PAGE进行鉴定。经紫外扫描,计算出其偶联比分别为7.60：1与7.65：1。用经过鉴定的免疫抗原免疫6-8周龄的健康BALB/c磁性小鼠,经过三次免疫后,将小鼠断尾采血,采用间接ELISA法测定其滴度,并考察特异性,结果表明免疫小鼠的血清效价均可达到25600以上,其中一只小鼠血清效价可达到51200,由此表明合成的免疫原具有较好的免疫原性,得了较好的免疫效果,获得了高效价的TBL抗血清,表示此特布他林完全抗原可以免疫动物,为后面进行免疫学检测方法准备了基础。为了能够建立一个具有灵敏度高、特异性强、重复性好等特点的ELISA分析方法,对于试验进程中的各个关键控制条件进行了鉴定、优化。优化后的几个关键条件是：包被原TBL-OVA的包被浓度为2μg/mL,包被时间为37℃温育2h后4℃过夜,用封闭剂为1%OVA封闭液封闭37℃温育2h,抗血清浓度为1：6400倍稀释,并37℃温育1h,将酶标二抗适当稀释为6000倍,同时37℃温育1h,底物显色10min。初步确立了标准曲线,曲线的拟合方程为y=-21.405x+74.179,R2=0.9970。经检测,最低检测限为5.17ng/mL;该抗体仅对沙丁胺醇及克伦特罗有交叉反应(交叉反应率分别为93.16%和91.14%),对其它药物的反应交叉率较小,回收率99.148%,变异系数为8.74%。本研究成功制备了特布他林人工抗原,初步探索了特布他林的ELISA检测方法,为进一步的研究特布他林快速检测试剂盒创造了条件,奠定了实验基础。