NOK与FGFR2在NSCLC中的表达及与NSCLC增殖的相关性研究

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研究背景目前肺癌发病率呈逐年上升趋势,居全世界癌症死因的首位,其中80%-90%的患者为非小细胞肺癌(NSCLC)。虽然肺癌的治疗方法在不断改进,但肺癌患者的五年生存率仍然很低。受体蛋白酪氨酸激酶(RPTKs)在调节肿瘤细胞凋亡、增殖、迁移等过程中起到相当重要的作用。含酪氨酸激酶结构域的新原癌基因NOK(Novel Oncogene withKinase-domain)是近年新发现的癌基因。NOK与成纤维细胞生长因子受体2(FGFR2)同属于受体蛋白酪氨酸激酶家族成员,且二者具有30%的同源性。Ki67可以有效反映细胞增殖情况,是目前使用最为广泛的细胞增殖标记。有研究表明NOK与FGFR2均与恶性肿瘤侵袭和转移相关,但对于二者在肺癌中的表达、生物学特性研究较少,尤其NOK与FGFR2在NSCLC中分级、分期及二者相互关系仍不清楚。同时,NOK与FGFR2对肿瘤增殖的影响等问题有待进一步研究。目的研究NOK与FGFR2在NSCLC中的表达、定位情况,探讨NOK与FGFR2在NSCLC中表达的相关性,研究NOK与FGFR2对NSCLC增殖的影响。方法1采用免疫组化法检测NOK与FGFR2在163例NSCLC中的表达情况并运用统计学软件分析二者相关性。2采用激光共聚焦显微镜观察NOK与FGFR2在NSCLC中的共定位情况。3选取52例NSCLC,采用RT-PCR、western blot法检测FGFR2在NSCLC组织及其正常组织中的表达情况,运用统计学软件分析组间差异。4采用免疫组化法检测163例NSCLC中Ki67表达情况,运用统计学软件分析NOK、FGFR2与Ki67表达的相关性。探讨NOK、FGFR2对NSCLC增殖的相关性。结果1通过免疫组化染色法检测发现,NOK、FGFR2在NSCLC不同TNM分期和病理分级间的阳性表达率差异性均有统计学意义(P<0.05)。NOK与FGFR2蛋白表达在总的NSCLC、肺鳞癌、肺腺癌组织中均呈正相关,P值均为0.000,相关系数rs分别为0.640、0.684、0.597。2采用两种免疫荧光二抗分别对NOK和FGFR2检测后,经激光共聚焦显微镜观察发现NOK与FGFR2表达存在共定位现象。NOK主要表达于NSCLC的细胞质中,FGFR2主要表达于细胞质和细胞膜。3经RT-PCR法检测显示,FGFR2在NSCLC组织中表达高于正常肺组织(P<0.05),且FGFR2在不同病理分级、TNM分期中表达有差异(P<0.05)。经westernblot法检测显示,FGFR2在NSCLC组织中表达高于正常肺组织(P<0.05)。该实验结果与免疫组化实验结果一致。4通过免疫组化染色法观察发现,NOK与Ki67蛋白表达在总NSCLC、肺鳞癌、肺腺癌组织中均呈正相关,P值为0.000,相关系数rs分别为0.523、0.463、0.580;FGFR2与Ki67蛋白表达在总的NSCLC、肺鳞癌、肺腺癌组织中均呈正相关,P值为0.000,相关系数rs分别为0.417、0.424、0.425。结论1、NOK、FGFR2在NSCLC组织中表达情况说明二者表达均与NSCLC的恶性程度有关,肺癌细胞分化越低,则NOK与FGFR2表达越高,表明二者可能与NSCLC肿瘤增殖有关。NOK、FGFR2在NSCLC组织不同TNM分期间的表达情况说明二者可能与NSCLC迁移、侵袭能力有关。二者表达存在相关性说明二者间可能存在相互作用的可能。2、NOK与FGFR2在NSCLC中表达存在共定位情况,进一步说明二者可能存在相互作用的可能,为二者相互作用的研究提供了依据。3、RT-PCR和western blot的结果进一步证明组织中FGFR2在NSCLC中的表达与NSCLC的增殖、迁移、侵袭有关,表明FGFR2可能与NSCLC的发生与发展有关。4、NOK、FGFR2与Ki67在NSCLC组织中的表达呈正相关,提示NOK与FGFR2的表达与NSCLC的增殖有关,但其具体机制有待进一步证明。
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