背景黄葛树（F.virens var sublanceolata,FVS）又名大榕树、黄桷树,是桑科榕属类植物中的一种,在中国最先产于西南和华南地区。研究指出,榕树叶中含有诸多物质,单宁、三萜皂苷、酸性树脂和黄酮糖苷等。其中黄酮类物质作用广泛,清热解毒、抗突变、抗菌、降压、镇静、抗炎、抗癌和抗氧化等,在医药领域,应用颇多。《中草药性备要》和《全国中草药汇编》记录了黄葛树叶的药用功效,祛风除湿,疏通经络,活血消肿,止痒敛疮。黄葛树叶资源丰富,具有诸多的药理活性,有一定的开发和研究价值。银杏黄酮的开发则是一个非常成功的案例。对于植物黄酮的提取有诸多方式,例如加热回流提取法,超声提取法,微波提取法,超临界提取法,酶解法,机械力化学提取法和红外及远红外提取法等。高效液相色谱是测定药物含量最经典的方法,测定方法一旦建立完善,能够稳定准确的进行相关物质的含量测定。因此,本文将从四个部分对黄葛树叶进行研究分析,分别为优化黄葛树叶总黄酮提取工艺,建立测定黄葛树叶提取物中相关物质含量的高效液相色谱方法,建立测定血浆样品中相关物质含量的方法和研究大鼠灌胃黄葛树叶提取物后的药代动力学初步特征。第一部分优化FVS叶总黄酮物质的提取工艺目的:优化FVS叶总黄酮提取工艺。方法:本研究采用回流提取方式;首先对各个实验条件参数进行单个逐一筛选,乙醇体积分数、料液比、水浴温度和提取时间,然后采取正交试验进一步优化提取条件,最后验证优化后的工艺;以芦丁作为定量FVS叶总黄酮的对照品,待测样品通过NaNO₂-Al（NO₃）₃-NaOH显色实验测定吸光度对总黄酮进行含量测定;结果:优化后的FVS叶总黄酮物质的提取工艺为:物料溶剂比为1 g:50 mL,提取溶剂为60%体积浓度的乙醇水溶液,水浴提取温度为95℃,提取时长为2 h。经实验验证,在最佳提取条件下,FVS叶中总黄酮的提取得率为3.74%,提取工艺重现性好。第二部分FVS叶提取物中CGA和RU的含量测定目的:建立测定黄葛树叶中绿原酸（Chlorogenic acid,CGA）和芦丁（Rutin,RU）含量的高效液相色谱法。方法:采取Waters e2695-2998（PAD）HPLC分析仪。使用ODS2色谱柱分离各分析物,柱温箱温度设定为25±2℃。待测样品采用梯度洗脱进行分离测定,有机相A为100%甲醇。无机相B为pH 3.0的磷酸溶液。总流速为1.0 mL·min^-1。所有流动相在使用前需要过滤杂质和脱气。样品测定采用自动进样器,设定进样体积为20μL。样品单次运行时间为72 min。结果:样品中各物质分离良好,CGA和RU分离度达到要求,无其他物质干扰。CGA和RU的相关系数r均大于0.9998。CGA和RU的LOQ均低于0.06μg·mL^-1,LOD均低于0.02μg·mL^-1。测定低、中、高浓度质控样品时,以RSD值表示的日内精密度分别小于1.45%、1.89%和0.73%,三个不同浓度样品的日间精密度分别小于1.68%、1.82%和1.34%,因此,本方法精密度较好。实验测得相对回收率（RR）在99.10%到104.7%之间。结论:本研究所建立的HPLC-PAD法能够用于分离和测定黄葛树叶提取物中CGA和RU的含量。第三部分大鼠血浆中C3AA含量测定方法的建立目的:建立测定大鼠灌胃60%乙醇提取液血浆中香豆素-3-羧酸类似物（Coumarin-3-carboxylic acid analogue,C3AA）含量的高效液相色谱法。方法:采取Waters e2695-2998（PAD）HPLC分析仪。将阿魏酸（Ferulic acid,FA）作为内标物质,香豆素-3-羧酸（Coumarin-3-carboxylic acid analogue,C3A）作为定量C3AA的替代对照品。利用ODS2色谱柱分离各分析物,柱温箱温度设定为30±2℃。待测样品采用梯度洗脱方式进行分离测定,有机相A为100%甲醇。无机相B为pH 3.0的磷酸溶液。总流速为1.0 mL·min^-1。所有流动相在使用前需要过滤杂质和脱气。样品测定采用自动进样器,设定进样体积为20μL。样品单次运行时间为72 min。结果:样品中各物质分离良好,FA和C3A分离度达到要求,无其他物质干扰。C3A线性方程中的相关系数r等于0.9990,具有良好线性关系。C3A的LOQ等于0.05μg·mL^-1,LOD等于0.02μg·mL^-1。测定低、中、高浓度质控样品,以RSD值表示的日内精密度分别为2.86%、2.30%和1.25%,日间精密度分别为3.58%、2.73%和1.84%。结果说明本方法精密度较好。相对回收率（RR）在99.05%到105.0%之间。结论:本研究所建立的HPLC-PAD法能够用于分离和测定大鼠灌胃60%乙醇提取液后血浆中C3AA的含量。第四部分黄葛树叶60%乙醇提取物药代动力学初步研究目的:初步研究黄葛树叶提取物药代动力学。方法:将大鼠灌胃60%乙醇提取液测定所得的血浆中C3AA的含量数据,通过整理、绘制得到C3AA血药浓度-时间曲线,PK solver 2.0软件对C3AA血药浓度数据进行计算得出相关药动学参数。结果:C3AA血药浓度-时间曲线可看出大鼠灌胃后血浆中C3AA浓度随时间的变化,曲线出现了双峰的现象。得到药动学参数t_1/2为1.89±0.03 h,T _max为0.39±0.14 h,C _max为1.81±0.10μg·mL^-1,AUC _0-t为7.88±0.24μg·mL^-1·h,MRT为3.23±0.14h、Vz/F为0.43±0.03(mg·kg^-1)·(μg·mL^-1)^-1,Cl/F为0.16±0.01(mg·kg^-1)·(μg·mL^-1)^-1·h^-1。结论:血药浓度-时间曲线和药动学参数在一定程度上反映出大鼠灌胃后的血中C3AA的吸收情况。