目的：颅脑创伤(traumaticbraininjury,TBI)是神经外科的常见病，其致残率和病死率非常高，胶质细胞源性神经营养因子(glialcellline-derivedneurotrophicfactor,GDNF)对多种神经元具有营养作用，本实验通过复制Marmarou’s大鼠闭合性颅脑损伤模型，采用组织芯片及免疫组化技术，研究闭合性颅脑损伤后不同时间GDNF及其受体GFRα-1、Ret在脑组织不同部位的表达情况，为研究GDNF在闭合性颅脑损伤中的神经保护作用提供理论与实验依据。 方法：采用清洁级雄性SD大鼠55只，体重350-400g。随机分为正常对照组、手术对照组及损伤后1h组、2h组、4h组、8h组、12h组、24h组、48h组、72h组和5d组。 复制Marmarou’s大鼠落体打击损伤模型。分别于损伤后不同时间行4％多聚甲醛灌注固定、取材。HE、桔花青(Einarson氏)尼氏体染色法观察脑损伤病理改变。用组织芯片仪制作组织芯片，SP法检测大脑皮质、海马和脑干神经细胞GDNF、GFRα-1、Ret的表达情况。采用Mias2000图像分析系统采集并计算阳性细胞数。全部数据均采用SPSS11.5forwindows分析软件进行统计处理，以P＜0.05为显著性差异的水准。 结果： 1病理学改变： 损伤组可见脑组织水肿、蛛网膜下腔出血及脑挫伤。部分神经细胞胞体固缩、深染，细胞核小而深染；部分神经细胞胞体肿胀，胞浆变空，核淡染。 2GDNF免疫组织化学染色结果： 对照组皮质、海马、脑干部位均有少量免疫反应阳性细胞表达，阳性物质定位于细胞浆和细胞核。 损伤组皮质、海马、脑干部位GDNF免疫反应阳性细胞数目增多，以胶质细胞为主，免疫反应阳性物质增加，主要位于打击、对冲部位皮质，海马以CA3、CA4区表达明显。 顶叶皮质GDNF免疫反应阳性细胞数于损伤后1h开始增多，2h达最大值，然后逐渐降低。与对照组比较，损伤后1h-12h组差别有极显著意义(p＜0.01)。损伤后24h-5d组与对照组比较差别有显著意义(p＜0.05)。 海马GDNF免疫反应阳性细胞数于损伤后1h开始增多，损伤后2h达高峰，然后逐渐降低。与对照组比较，损伤后1h-24h组差别有极显著意义(p＜0.01)，损伤后48h组与对照组比较差别有显著意义(p＜0.05)，损伤后72h-5d组差别无显著意义(p＞0.05)。 脑干GDNF免疫反应阳性细胞数于损伤后1h开始增多，损伤后2h达高峰，然后逐渐降低。与对照组比较，损伤后1h-12h组差别有极显著意义(p＜0.01)，损伤后24h-48h组与对照组比较差别有显著意义(p＜0.05)，损伤后72h-5d组差别无显著意义(p＞0.05)。 3GFRα-1免疫组织化学染色结果： 对照组皮质、海马、脑干部位均有少量GFRα-1免疫反应阳性细胞表达，阳性物质定位于细胞浆和细胞核。 损伤组皮质、海马、脑干部位GFRα-1免疫反应阳性细胞数目增多，免疫阳性物质增加，胶质细胞表达尤为明显，主要位于打击、对冲部位皮质，海马CA3、CA4区及齿状回表达明显。 顶叶皮质GFRα-1免疫反应阳性细胞数于损伤后1h表达开始增多，4h达最大值，然后逐渐降低。与对照组比较，损伤后1h-12h组差别有极显著意义(p＜0.01)，损伤后24h-5d组与对照组比较差别无显著意义(p＞0.05)。 海马GFRα-1免疫反应阳性细胞数于损伤后1h开始增多，损伤后4h达高峰，然后逐渐降低。与对照组比较，损伤后1h-24h组差别有极显著意义(p＜0.01)，损伤后48h组与对照组比较差别有显著意义(p＜0.05)，损伤后72h-5d组与对照组比较差别无显著意义(p＞0.05)。 脑干GFRα-1免疫反应阳性细胞数于损伤后1h开始增多，损伤后4h达高峰，然后逐渐降低。与对照组比较，损伤后1h-12h组差别有极显著意义(p＜0.01)，损伤后24h组与对照组比较差别有显著意义(p＜0.05)，48h-5d组与对照组比较差别无显著意义(p＞0.05)。 4Ret免疫组织化学染色结果： 对照组皮质、海马、脑干部位均有少量Ret免疫反应阳性细胞表达，阳性物质定位于细胞浆和细胞核。 损伤组皮质、海马、脑干部位Ret免疫反应阳性细胞数目增多，免疫阳性物质增加，胶质细胞表达尤为明显，主要位于顶叶皮质、对冲部位，海马CA3、CA4区表达明显。脑干免疫反应阳性神经元及胶质细胞增多。 顶叶皮质Ret免疫反应阳性细胞数于损伤后1h表达开始增多，4h达最大值，然后逐渐降低。与对照组比较，损伤后1h-12h组差别有极显著意义(p＜0.01)，损伤后24h-5d组与对照组比较差别无显著意义(p＞0.05)。 海马Ret免疫反应阳性细胞数于损伤后1h开始增多，损伤后4h达高峰，然后逐渐降低。与对照组比较，损伤后1h-12h组差别有极显著意义(p＜0.01)，损伤后24h组与对照组比较差别有显著意义(p＜0.05)，损伤后48h-5d组与对照组比较差别无显著意义(p＞0.05)。 脑干Ret免疫反应阳性细胞数于损伤后1h开始增多，损伤后4h达高峰，然后逐渐降低。与对照组比较，损伤后1h-24h组差别有极显著意义(p＜0.01)，损伤后48h-5d组与对照组比较差别无显著意义(p＞0.05)。 结论： 1正常时皮质、海马、脑干部位均有少量GDNF免疫反应阳性细胞表达。脑损伤后皮质、海马、脑干部位GDNF表达增强，免疫反应阳性细胞数目增多，损伤后1h皮质、海马、脑干部位GDNF表达开始增强，2h达高峰，然后逐渐降低。 2正常时皮质、海马、脑干部位均有少量GFRα-1免疫反应阳性细胞表达。脑损伤后皮质、海马、脑干部位GFRα-1表达增强，免疫反应阳性细胞数目增多，损伤后1h皮质、海马、脑干部位GFRαt-1表达开始增强，4h达高峰，然后逐渐降低。 3正常时皮质、海马、脑干部位均有少量Ret免疫反应阳性细胞表达。脑损伤后皮质、海马、脑干部位Ret表达增强，免疫反应阳性细胞数目增多，损伤后1h皮质、海马、脑干部位Ret表达开始增强，4h达高峰，然后逐渐降低。 4GDNF及其受体在闭合性颅脑损伤早期即明显表达，而后逐渐降低，在损伤后表达的时序性变化特点基本一致，共同参与脑损伤的病理生理过程。