自从纳米科技产生以来,纳米技术就受到了广泛的关注并得到了迅速的发展.其中,磁性纳米粒子因其粒径均一、比表面积大,超顺磁性等优点,受到科研人员的青睐,在蛋白质和固定化酶,免疫测定,RNA和DNA纯化,细胞分离和识别,靶向给药和PCR等问题中发挥着日益重要的作用。造血干细胞移植可以治疗白血病、淋巴瘤、多发性骨髓瘤等血液系统恶性疾病,在医学上有着重要的意义。但是分离出高纯度的造血干细胞是造血干细胞移植的前提步骤,成为造血细胞工程的限制性因素。造血干细胞有多种细胞表面标志,但是鉴别造血干细胞最常用的是CD34抗原。CD34单克隆抗体可以特异性的识别造血干细胞表面的CD34抗原,因此可以利用磁性纳米粒子与CD34单克隆抗体结合形成磁性纳米粒子-抗体复合物即免疫磁性纳米粒子,在外加磁场下快速分离出高纯度的CD34+细胞。本文主要研究了免疫磁性纳米粒子的制备及从脐带血中分离CD34+细胞。(1)通过共沉淀法合成了具有超顺磁性的γ-Fe2O3纳米粒子,在由TritonX-100、正己醇、环己烷构成的反相微乳液体系中,通过正硅酸乙酯的氨水催化水解在γ-Fe2O3表面包裹了一层具有生物亲和性的二氧化硅层,形成了核壳型磁性纳米粒子。再通过氨基硅烷在其表面上修饰上具有活性的氨基官能团.TEM表明磁性纳米粒子呈均匀的粒径和良好的单分散性;红外表征氨基已经成功修饰在磁性纳米粒子表面。氨基化的磁性纳米粒子通过化学反应与抗体连接,形成磁性纳米粒子-抗体复合物,并通过了紫外表征。磁性纳米粒子与不同的抗体连接则可以分离不同的细胞,为生物学上各种细胞的分离研究提供了手段。(2)对硝基苯甲醛比色测定法测定氨基量快速方便,且无毒,与其它方法比较具有很大的优势。采用对硝基苯甲醛比色测定法可以实现磁性纳米粒子界面的氨基定量化,对后续定量连接生物分子非常重要;对硝基苯甲醛比色测定法还帮助研究了不同反应条件下磁性纳米粒子表面界面的氨基量,有助于优化硅烷化界面活性反应和需进一步系统地研究高性能材料生产中反应条件的影响。(3)将磁性纳米粒子-CD34抗体复合物加入到需要分离的样品中,磁性纳米粒子便可以与目的细胞进行特异性结合,再用外磁场对连有磁性纳米粒子的目的细胞进行阻留,从而实现分离。结果显示利用磁性纳米粒子-抗体复合物可以快速、高效地将CD34~+细胞从脐带血中分选出来,而且分离后CD34~+细胞仍然保持正常形态、高度的增殖能力和多向分化能力,表明磁性纳米粒子-抗体复合物分离CD34~+细胞技术具有很好的效果。