【摘 要】
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目的：研究hTR(human telomerase RNA)基因反义寡核苷酸(hTRR)对鼻咽癌细胞放射增敏作用及其机制，为寻求新的放疗增敏剂奠定理论基础。
方法：⑴人端粒酶反义寡核苷酸由广州
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目的：研究hTR(human telomerase RNA)基因反义寡核苷酸(hTRR)对鼻咽癌细胞放射增敏作用及其机制，为寻求新的放疗增敏剂奠定理论基础。
方法：⑴人端粒酶反义寡核苷酸由广州吉赛生物科技有限公司合成，序列为5‘-GTTAGGGTTAG-3，另外合成一段该基因的正义链5‘-CTAACCCTAAC-3（缩写为hTRF），用LipofectamineTM2000(缩写为Lip)将正反义链转入鼻咽癌CNE-2细胞内，并用流式细胞术(FCM)检测转染效率;⑵指标的检测:用CCK-8法检测hTRR对CNE-2细胞增殖的影响;用克隆形成实验分析hTRR对CNE-2细胞的放射增敏作用;用FCM法检测hTRR对CNE-2细胞凋亡和周期的影响;用Flow-Fish法检测hTRR处理前后端粒长度的变化;⑶统计方法:实验结果以均数±标准差((x)±s)表示。所得数据采用统计学软件SPSS17.0进行统计学分析，不同处理组间比较用方差分析，方差齐采用方差分析及LSD进行检验，不齐则用Welch近似方差分析及Dunnetts T3进行检验，P＜0.05为差异有统计学意义。
结果：hTRR能够抑制CNE-2细胞的增殖，其中hTRR2.5μg/Lip6.25μl时增殖抑制最明显，抑制率为（73±0.69）％（P＜0.01），hTRF2.5μg/Lip6.25μl组和单独Lip7.5μl组与未处理组（没有hTRR和Lip处理）相比增殖抑制均无明显差异（P＞0.05）。hTRR能够增强CNE-2细胞的放射敏感性，hTRR联合放疗组与单纯放疗组相比，其放射增敏比(SER)为1.479。hTRR诱导CNE-2细胞凋亡，hTRR组、单纯放疗组凋亡率为（9±2.2）％、（14.2±2.1）％（P＜0.05），hTRR加放疗组凋亡率最高，为（23.8±1.87）％(P＜0.01)。hTRR组G2/M、S期细胞比例与对照组无明显差异，且hTRR联合放疗与单纯放疗组相比，G2/M、S期细胞无明显差异。因此，本实验结果显示，hTRR对CNE-2细胞周期分布的改变无明显影响。hTRR可引起鼻咽癌CNE-2细胞端粒长度缩短，单用hTRR组平均端粒长度从3894缩短到2539，单放组缩短到2709，而hTRR加放疗组缩短到1041。
结论：hTRR通过增强鼻咽癌细胞的凋亡增加放射敏感性。
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