真核生物的基因表达是一个复杂的过程,每一个过程的实现都受到复杂严格的调控。一般意义上的基因调控主要指发生在转录和翻译水平的调控,而其中涉及的一些分子机制,随着更多深入的研究已日渐清晰。在此基础上人们开始关注到发生在转录后水的调控,转录后水平的调控也就是对mRNA的调控。mRNA作为DNA与蛋白质之间的一个信息分子,其半衰期的变化在很大的程度上影响了基因的表达。提到mRNA的半衰期,与其存在密切关联的顺式作用元件及反式作用因子则是不可避免的话题,细胞中存在着多种多样的顺式作用元件及其对应的反式作用因子。而在我们的实验体系中重点关注的是ARE元件,及其对应的mRNA稳定结合蛋白HuR。HuR隶属于Hu家族蛋白,Hu家族蛋白又称为胚胎致死异常视觉家族蛋白（ELAV）。该蛋白家族包括成员包括能在多种组织及细胞中广谱表达的HuR以及其他特异性的在神经系统中表达的成员Hu B/He IN1,Hu C/PLE21,Hu D,且该其家族成员的空间结构域是高度保守的,即都存在三个RRMS以及一个HNS结构域。因此Hu家族蛋白能够通过与靶mRNA的ARE元件结合,调控其对应靶mRNA的稳定性。HuR作为一种广谱表达的mRNA结合蛋白,其生物学功能机制的研究一直以来都受到广泛的关注。我们前期在小鼠巨噬细胞中发现核酶PARP-1能够通过对mRNA结合蛋白HuR进行PAR修饰,影响HuR核质分布,最终调控mRNA的稳定性。为了探究在我们前期实验过程中发现的HuR的PAR修饰与研究较为深入的HuR的磷酸化修饰二者之间的关系,我们进行了一系列的实验。鉴于LPS实验刺激模型的特殊性以及考虑到实验过程中需要进行大量的质粒转染实验我们选择了293/h TLR4-MD2-CD14细胞系。实验结果表明,在我们的实验体系中,PARP-1可以影响HuR的核质穿梭,且这种影响是依托于PARP-1对HuR HNS结构域上第226位天冬氨酸进行PAR修饰实现的;与此同时我们发现HuR HNS结构域上的第232位丝氨酸位点对LPS刺激作用下HuR的核质穿梭的实现是至关重要的;在综合考虑到HuR的PAR与HuR的磷酸化作用二者之间是否存在一定的关联时,我们进行了免疫共沉淀实验,结果显示无论是加入PARP-1的功能抑制剂PJ34还是将PARP-1特异性干涉掉,HuR的磷酸化作用也受到明显的抑制。本研究初步确立了HuR的PAR化与HuR磷酸化之间的相互作用,为进一步深入揭示二者之间相互作用的分子机制奠定了基础。