【摘 要】
：
拟赤梢鱼（Pseudaspius leptocephalus）作为东北地区土著名优鱼类“三花五罗”中的“鸭罗”,在经济领域和学术研究领域具有重要的价值。由于近年来环境污染严重,加之捕捞过度,其野生资源量日趋匮乏,亟需开展拟赤梢鱼的保护性研究工作。本研究以拟赤梢鱼为研究对象,通过石蜡切片观察,从组织学水平探究其性腺分化、发育的时空变化规律;同时采用RACE技术克隆了foxl2、dmrt1、sox3、
论文部分内容阅读
拟赤梢鱼（Pseudaspius leptocephalus）作为东北地区土著名优鱼类“三花五罗”中的“鸭罗”,在经济领域和学术研究领域具有重要的价值。由于近年来环境污染严重,加之捕捞过度,其野生资源量日趋匮乏,亟需开展拟赤梢鱼的保护性研究工作。本研究以拟赤梢鱼为研究对象,通过石蜡切片观察,从组织学水平探究其性腺分化、发育的时空变化规律;同时采用RACE技术克隆了foxl2、dmrt1、sox3、gsdf 4个性腺发育相关基因,并对其序列进行生物信息学相关分析;利用q RT-PCR检测了上述性腺发育相关基因的组织表达特性和时空表达规律,从分子生物学水平揭示拟赤梢鱼性腺发育与分化规律;本研究还检测了拟赤梢鱼精子特性。主要研究结果如下:1.拟赤梢鱼早期性腺发育的组织学观察。孵化后15 d,原始性腺初步形成;第45 d椭圆形性腺中可明显观察到卵巢腔的存在,标志卵巢的形成;75 d时,梭形性腺出现精细小管,同时观察到精原细胞,标志精巢分化。第120 d时,卵巢中卵母细胞核仁沿细胞核分布;精巢准备形成精小叶,性腺进入II期发育。卵巢发育至260 d时,部分卵母细胞细胞质中出现卵黄核,进入II期中期,而此时精巢中次级精母细胞数目较多。在360 d时精巢、卵巢仍处于II期。2.拟赤梢鱼foxl2和sox3克隆及时空表达特征分析。foxl2基因c DNA（1841 bp）共编码303个氨基酸,含叉头结构域。与其他鱼类foxl2氨基酸序列相似度在99.34%-83.12%之间,保守性较高。sox3基因c DNA全长1800 bp,共编码氨基酸299个,存在HMG结构域。拟赤梢鱼与其他鱼类sox3氨基酸序列相似度在98.66%-86.75%之间。foxl2基因在拟赤梢鱼卵巢中的转录水平远超精巢及其他组织水平;在性腺分化阶段,卵巢中foxl2基因转录水平明显高于未分化性腺,精巢中转录水平最低。随着分化后性腺的发育,卵巢中foxl2基因表达量逐渐上调,而精巢中的转录始终处于低水平。结果表明:foxl2基因在拟赤梢鱼卵巢分化与卵巢早期发育过程中发挥重要功能。卵巢中sox3基因的转录水平远远超出精巢的转录水平,其转录在脑中同样检测到较高水平。在早期性腺分化阶段,卵巢中sox3基因的转录水平高于尚未分化的性腺和精巢,且精巢中的转录水平最低。在分化后卵巢的发育中sox3基因表达水平不断提高,而在精巢中持续低水平表达。结果推测sox3基因在拟赤梢鱼卵巢分化与维持卵巢发育过程中发挥的作用强于精巢。3.拟赤梢鱼dmrt1和gsdf克隆与时空表达特征分析。拟赤梢鱼dmrt1 c DNA全长1743 bp,编码292个氨基酸,DM结构域高度保守。gsdf基因c DNA全长1485bp,编码195个氨基酸,含有TGF-β结构域。拟赤梢鱼gsdf氨基酸序列与其他鱼类的同源性在92.31%-38.68%区间不等。dmrt1基因在拟赤梢鱼精巢中检测到转录水平远远高于卵巢转录水平。在早期性腺分化阶段,精巢中的转录水平明显高于同期未分化性腺和卵巢。在分化后精巢的发育中,dmrt1基因表达量逐渐上调,显著高于同期卵巢的表达水平。结果表明:拟赤梢鱼dmrt1基因可能在诱导精巢分化和维持精巢发育过程发挥关键功能。gsdf基因在拟赤梢鱼各组织中均有表达,但在精巢中表达量最高。在早期性腺分化阶段,精巢中gsdf基因转录水平显著高于未分化性腺和卵巢,且在卵巢中的转录水平最低;在分化完成后的精巢和卵巢后期发育过程中,gsdf基因表达水平不断增加,但是精巢中gsdf基因转录水平始终高于同期卵巢。结果说明,gsdf基因参与拟赤梢鱼精巢分化的同时,在精巢早期发育中可能发挥着更加重要的作用。4.拟赤梢鱼精子特性与精子活力观察。拟赤梢鱼精液浓度为20.39±2.82%;精子密度（1.38±0.42）×1010个/m L;精浆p H为7.04±0.53,呈中性。拟赤梢鱼精子活力在p H7.0时最高;在0.02-0.14 mol/L的Na+、K+溶液中,精子激活率均在0.02mol/L时最高;而精子FT、MT和LT分别在0.08 mol/L的Na+溶液和0.10 mol/L的K+溶液中达到最高。在0.003-0.021mol/L的Ca2+、Mg2+溶液中激活受到明显抑制。在0.22 mol/L的Glu和Gly溶液中,精子FT、MT和LT均得到显著延长。
其他文献
加州鲈（Micropterus salmoides）肉质嫩,生长快,适应广,是我国重要的养殖品种之一。而病害成为制约其产业发展的因素之一。镰刀菌（Fusarium）分布广泛,能侵染各种植物、人类和水产动物等。鱼类在体表损伤或处于不良养殖环境时,容易感染镰刀菌,发病迅速,致死率较高,造成重大的经济损失,目前尚无有效的防治方法。因此,有必要开展镰刀菌病的研究。2019年7月,某循环水室饲养的加州鲈头部
泛滥性平原湖泊是世界上物种最丰富和生产力最高的生态系统之一,为人类提供了丰富的生态系统功能和服务,是人类可持续发展的基础。长江中下游湖泊众多,多数浅水湖泊通过通江河道与长江干流保持水文连通,形成江湖复合生态系统,生物生产力极高。近年来,为了满足人类发展需求,建闸修坝、围垦湖泊、水质污染、过度捕捞等人类活动干扰严重,造成江湖阻隔、生境破碎化、水生环境破坏等问题凸出,湖泊生态系统功能和渔业资源显著下降
长江下游苏通江段地处感潮区,受潮汐作用强烈,水文环境特殊,是长江洄游型刀鲚的必经洄游通道,同时该江段拥有多沙洲、浅滩分布,具有独特的干流-沙洲生境。为了解苏通江段鱼类早期资源的时空分布概况和该特殊生境下苏通江段的两个主要沙洲（长青沙和民主沙）仔稚鱼的群聚特征,本研究于2018～2020年每年5～8月对该江段共累计进行84天的早期资源调查,主要研究结果如下:1、长江苏通江段鱼类资源组成分析显示:调查
脊柱畸形是鱼类集约化养殖的主要疾病之一,异常的脊椎发育可能会影响鱼的运动和捕食,导致生长速度减慢和对疾病的高度敏感性,严重的脊柱畸形也可能导致鱼类死亡。卵形鲳鲹是我国华南沿海一种重要的海水养殖鱼类,其骨骼畸形率可超过30%,椎体融合发生率可达37.4%。卵形鲳鲹生长和发育对水温有很强的依赖性,不适的温度会诱导骨骼畸形的发生。然而,骨形成分子调控途径内容仍然未能被理解与掌握,尤其在鱼类中的研究较少,
恩诺沙星（Enrofloxacin,ENR）为第三代人工合成喹诺酮抗菌药,为兽医专用抗菌药,因其高效的抗菌能力被广泛运用于水产动物疾病的治疗与预防。随着集约化沉水植物养殖日益发展,高密度的养殖模式使得恩诺沙星等抗菌药使用量剧增,导致水体不断蓄积残留的抗菌药,最终随养殖尾水进入自然水域。养殖尾水中抗菌药残留问题已经越来越受到社会的重视,如何净化养殖尾水中的抗菌药物已成为水产养殖业的重大难题。沉水植物
中华绒螯蟹（Eriocheir sisensis H.,以下简称河蟹）,又称大闸蟹、河蟹或螃蟹,营养丰富、肉味鲜美,经济价值较高,是我国特有的淡水名优品种和出口创汇水产品,历来就是百姓餐桌上的美味佳肴,深受消费者青睐。近年来,河蟹的养殖区域不断扩大,北至黑龙江省、南至两广地区,养殖模式不断创新且产量日益增大,但由于其上市时间集中、供应期较短,不能满足消费者日益增长的需求。因此,如何延长河蟹的上市周
本论文主要分为三大部分:一是研究盐度骤变对金钱鱼幼鱼鳃线粒体丰富细胞形态结构变化及其渗透调节机制影响;二是研究不同盐度对金钱鱼幼鱼鳃线粒体丰富细胞形态结构变化及其渗透调节机制影响;三是研究盐度对金钱鱼幼鱼鳃Na+-K+-ATPase酶活及Na+-K+-ATPaseβ基因的表达分析。探究金钱鱼幼鱼在不同盐度的急性和慢性胁迫下的渗透调节作用。1.盐度骤变对金钱鱼幼鱼鳃线粒体丰富细胞形态结构的影响外界盐
在水生态系统中,研究鱼类种群参数、食物网营养结构和生态位特征,对资源利用评估、湖泊生态管理等意义重大。本研究在太湖竺山湖进行了为期一年的定点采样,选择优势小型鱼类,运用ELEFANⅠ和LBB两种方法对其种群参数和利用状况进行了评估,并分析了浮游动植物等食物源与鱼类之间的关系,讨论了主要小型鱼类的营养、空间和时间生态位的宽度与重叠,为评估竺山湖水域渔业资源的利用情况提供参考,以及为渔业管理提供支持。
嗜冷黄杆菌（Flavobacterium psychrophilum）是一种革兰氏阴性菌,该菌主要感染鲑科鱼类并引起细菌性冷水病（Bacterial coldwater disease,BCWD）。自1948年从北美患病银鲑（Oncorhynchus kisutch）体内分离到嗜冷黄杆菌以来,已在欧洲、南美洲、亚洲、澳洲等世界各地的集约化鲑鳟鱼主养区分离到该菌,可见其流行和传播范围之广。嗜冷黄杆菌
本研究以我国北方重要海水养殖鱼类红鳍东方鲀（Takifugu rubripes）为研究对象,在研究红鳍东方鲀幼鱼支链氨基酸（亮氨酸、异亮氨酸和缬氨酸）的营养需求基础上,进一步探讨红鳍东方鲀对饲料中支链氨基酸之间可能交互作用的响应,以期阐明红鳍东方鲀利用饲料不同水平支链氨基酸的特点,为红鳍东方鲀配合饲料精准设计提供理论依据。研究包括四个部分:1.红鳍东方鲀幼鱼异亮氨酸营养需求研究本实验通过研究饲料中