论文部分内容阅读
目的通过建立大鼠眼视网膜脱离（Retinal detachment，RD）模型，观察RD复位后采用向玻璃体腔注入脑源性神经营养因子（Brain-derived neurotrophicfactor， BDNF）的给药方式，从光感受器细胞的凋亡，RD复位后视网膜形态学和视网膜细胞超微结构方面探讨BDNF对RD损伤后视网膜修复的影响，为采用神经营养因子抑制RD复位后细胞凋亡，促进视网膜功能恢复提供理论依据。方法1.取健康SD大鼠56只，通过在视网膜下注射透明质酸钠的方法建立RD模型，并观察视网膜自动复位的时间。2.将56只大鼠随机分为四组，BDNF实验组、实验对照组、RD复位组和正常对照组，BDNF实验组、实验对照组在视网膜自动复位的当日分别在玻璃体腔注射BDNF（20μg/ml）10μl和生理盐水（normal saline， NS）10μl。3.采用光镜和电镜观察RD复位后视网膜形态和视网膜细胞超微结构，检测BDNF对RD造成的视网膜变性的影响；采用原位缺口末端原位末端转移酶标记法（Terminal deoxynucleotidyl transferase–mediated deoxyuridine triphosphatenick-end labeling，TUNEL）检测BDNF对RD复位后视网膜细胞凋亡的影响。结果1.视网膜自动复位的平均时间为31.3±3.5天。2.光镜观察：与正常对照组相比，RD复位后视网膜整体厚度变薄，内核层，内外核层厚度变薄，尤以外核层明显，视锥视杆细胞层细胞稀疏，排列紊乱，外从状层明显变薄；神经节细胞层细胞数目变少，神经纤维层变薄。与实验对照组相比，BDNF实验组视网膜整体厚度较实验对照组厚，内外核层皆较厚，尤以外核层明显，光感受器细胞层排列更整齐，细胞密度较大，神经节细胞层细胞数目较多，排列较好。视网膜外核层厚度比较：正常组视网膜外核层厚度平均为39.446μm，与其余各组比较有统计学意义（P＜0.05）；BDNF实验组平均厚度为23.509μm，实验对照组平均厚度为13.496μm，BDNF实验组与实验对照组相比较有显著性差异（P＜0.01）。视网膜内核层厚度比较：正常组视网膜内核层厚度平均为24.636μm，与其余各组相比有统计学意义（P＜0.05）；BDNF实验组平均厚度为21.166μm，实验对照组平均厚度为16.084μm，BDNF实验组与实验对照组相比较有显著性差异（P＜0.01）。3.电镜观察：与正常对照组相比，RD复位组视网膜各层损害都较严重，各层结构排列紊乱，空泡样变，内核层细胞核周间隙变大，核染色质疏松，核有溶解；神经节细胞核染色质疏松，纤维层神经节细胞轴突肿胀。与实验对照组相比，BDNF实验组内外节损害较轻、视细胞数较多、外核层较厚、视网膜结构和层次排列较好，视网膜各层变性较轻。4. TUNEL观察：除正常对照组外，BDNF实验组，实验对照组，RD复位组都能见到TUNEL阳性细胞，主要在视网膜内外核层，感光细胞层间也可见。实验对照组和RD复位对照组内外核层和光感受器细胞层TUNEL阳性细胞清晰可数，而BDNF实验组内外核层及感光细胞层间TUNEL阳性细胞较实验对照组少。结论1.RD复位后视网膜形态及视网膜细胞超微结构发生了改变。2.RD复位后视网膜的视细胞有凋亡的存在。3.外源性BDNF能抑制RD复位后视网膜细胞的凋亡，对视网膜脱离复位后视细胞损伤有一定的保护作用，为采用神经营养因子促进视网膜功能恢复提供新的理论依据。