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喹诺酮类(quinolones，QNs)药物是二十世纪60年代发展起来的化学合成类抗菌药，氟喹诺酮类(fluoroquinolones，FQs)药物是第三代QNs，因其抗菌谱广、抗菌力强、组织分布广、不良反应少而被广泛应用于人医和兽医临床。恩诺沙星(Enrofloxacin，ENR)是世界上第一个畜禽专用的FQs，自二十世纪80年代上市以来，该药在预防和治疗畜禽细菌性和霉形体性疾病方面效果良好，是应用最为广泛的兽药品种之一。兽药吸收进入机体后，经生物转运和生物转化后，在一定时间内，少部分药物将残留于动物组织细胞内，而大部分药物将排泄出体外，最终进入环境。残留兽药将带来食品安全隐患，而进入环境的药物可能会造成生态环境的破坏。为了监控QNs在动物性食品中的残留和全面了解ENR在动物体内的代谢和排泄规律，本文进行了QNs在动物性食品中残留的确证分析方法的建立和ENR在不同种属动物体内的代谢和排泄的比较研究，进而为评估和监控此类药物的食品安全风险和环境安全风险提供依据。
1.QNs在牛奶和鸡蛋中残留的液-质联用方法的建立及应用
首先建立了牛奶中10种FQs(麻保沙星、诺氟沙星、氧氟沙星、培氟沙星、环丙沙星、洛美沙星、达氟沙星、恩诺沙星、沙拉沙星和二氟沙星)残留检测的液相色谱-大气压化学电离-离子阱质谱和牛奶或鸡蛋中13种QNs(上述10种FQs和噁喹酸、萘啶酸及氟甲喹)残留检测的液相色谱-电喷雾电离-串联四极杆质谱3个确证方法。然后，对方法的特异性、准确性、精密度和灵敏度等参数进行了全面的验证。最后，应用所建立的检测方法对给与恩诺沙星牛奶和市场抽查的商品牛奶进行了FQs的残留分析。
牛奶或经匀浆后的鸡蛋用乙腈-三氯乙酸沉淀蛋白，超声波提取，离心，上清液经反相聚合物柱(strata-X)SPE净化和浓缩。样品以乙腈-三氟乙酸溶液或乙腈-甲酸溶液为流动相、经C18柱HPLC梯度洗脱分离，用APCI-离子阱-多级质谱仪或ESI-串联四级杆质谱仪以多级反应监测(multi-reactionmonitoring，MRM)方式，定性和定量分析了13种喹诺酮类药物的残留。
方法的验证结果表明：样品前处理过程简便、快速、使用有机溶剂少和适用范围广；对牛奶和鸡蛋中13种QNs(APCI-离子阱方法能对部分FQs)的残留既能定性又能定量分析；方法的特异性强、回收率高、变异系数小、检测限(≤1ng/mL)和定量限低(≤5ng/mL)。检测市场抽查商品牛奶的结果发现部分产品中环丙沙星和氧氟沙星残留超标严重。
2.恩诺沙星在大鼠、猪、山羊和鸡体内代谢和排泄的比较研究
首先建立并验证了大鼠、猪、山羊和鸡排泄物中的恩诺沙星和环丙沙星(ciprofloxacin，CIP)的液相色谱-荧光检测法(highperformanceliquidchromatography-fluorescencedetection，HPLC-FLD)。然后，将4种动物的各10只试验动物(山羊8只)单次灌服10mg/kg.W的恩诺沙星溶液，在0h～144h定期收集动物的尿和粪，用HPLC-FLD测定排泄物中的ENR及其代谢产物CIP的含量及建立了代谢指纹图谱。最后，用LC-MS/MS对大鼠和猪尿中的代谢物进行了初步鉴定。
动物粪经两次匀浆后加乙腈-氨水溶液、超声波提取、离心，上清液用三氯乙酸再次沉淀和酸化后(或动物尿直接酸化)处理，高速离心后，上清液经反相-阳离子交换聚合物柱(Strata-XC)SPE净化和浓缩，样品以乙腈-柠檬酸-乙酸氨-三乙胺缓冲液为流动相、经BDS-C18柱HPLC梯度洗脱分离，用荧光检测器(激发波长Ex=278nm，发射波长Em=465nm)检测。
4种动物对ENR的代谢和排泄的主要结果为：排泄速度由快到慢为鸡＞大鼠＞猪＞山羊；排泄ENR量相当于给药量的比例为鸡(37％)＞猪(24％)＞大鼠(18％)＞山羊(12％)；代谢生成CIP量相当于给药量的比例为猪(21％)＞鸡(16％)＞山羊(15％)＞大鼠(6％)；排泄物中CIP/ENR比例为山羊(1.3)＞猪(0.9)＞鸡(0.45)＞大鼠(0.3)；指纹图谱中色谱峰的数量(尿/粪)为猪11(8/3)、大鼠11(6/5)＞山羊8(5/3)＞鸡2。用液相色谱-质谱联用对大鼠尿和猪尿的代谢物进行初步鉴定的结果表明：ENR在这2种动物体内除代谢成CIP外，还有N-脱亚乙基、N-氧化和结合等多种代谢方式，环丙沙星还可进一步代谢。