目的：通过文献挖掘,中药成分数据库,靶点数据库等生物信息学方法,探讨中医药在治疗心衰过程中对于心肌细胞凋亡的作用及影响,以期全面梳理中药通过干预细胞凋亡途径防治心血管疾病的多靶点药理药效机制,为进一步预测中药单味药及复方靶点群提供理论依据。并针对益心解毒方药味化学成分进行靶点分析及细胞凋亡通路预测,找出益心解毒方对细胞凋亡P53途径的作用。阐明益心解毒方通过影响细胞凋亡干预心力衰竭病理转归的药理学作用特点。并为中药复方药理学机制的研究提供新的思路和方法。方法：1.对2005-2012年中国知网全文数据库(CNKI)及Pubmed全文数据库中涉及中药与心肌细胞凋亡的相关文章进行检索总结,并结合HIT (Herbal Ingredients’Targets Database)数据库和GenCLiP2.0(Human Gene function and network analysis)分析软件对检索出的中药基因靶点进行聚类分析和网络构建。2.结合课题组前期KEGG通路分析结果和GenCLiP2.0分析结果,确定益心解毒方影响细胞凋亡的主要通路。用HIT数据库对益心解毒方中六味中药的基因靶点进行检索后采用DAVID数据库将益心解毒方整方与拆方的基因靶点比对进行P53通路的分析,找出通路中可能的作用靶点及组方特色的药理学基础。为后期实验研究建立理论基础和研究方向。3.建立左冠脉结扎法制备大鼠心力衰竭动物模型,术后给与益心解毒方并对其进行宏观的药效学评价。利用分子生物学技术,例如免疫组化(Immunohistochemistry, IHC),蛋白免疫印迹(Western blotting, WB), PCR等对前期益心解毒方细胞凋亡P53通路的已预测靶点进行实验验证。结果：1.文献总结得到与心肌细胞凋亡相关频率出现最高的16味中药,通过HIT数据库对这16味中药进行检索,得到269个靶蛋白,其中与细胞凋亡相关的蛋白靶点占总靶点数的21.7%。在与蛋白靶点相关的531个基因中,与心血管密切相关191个,与凋亡KEGG通路相关68个,网络分析结果中有210个基因相互关联构成复杂的作用网络。2.通过HIT数据库和DAVID数据库预测提示益心解毒方除去金银花作用于P53心肌凋亡通路潜在药物靶标为:P53, Fas, Bax, Caspase3, P21, PAI, Caspase9, Apaf-1, CyclinD, CDK2。而与益心解毒方全方成分靶点分析比较,发现金银花在P53通路上增加了对Mdm2蛋白的影响,方中其他药物均不影响这个蛋白。3.超声心动结果显示心梗后28天,模型组心功能明显下降；给予益心解毒方干预后28天,大鼠心功能有明显改善,与模型组相比差异显著;HE染色结果提示益心解毒方组与地高辛组的梗死边缘区心肌的变性细胞、坏死的程度和面积均比模型组少；大鼠心肌石蜡切片TUNEL检测结果显示,益心解毒方组和地高辛组的细胞凋亡比率与模型组比较有明显改善；免疫组化结果显示,治疗后益心解毒方组和地高辛组细胞浆中表达的Caspase3弥散性棕黄色产物明显少于模型组,益心解毒方组细胞核周围P53阳性表达明显小于模型组,灰度值统计均有明显差异。Western blotting结果显示,益心解毒方组能够明显抑制心肌组织中Bax, Fas的表达,且对Fas的抑制明显强于地高辛组；而对B c1-2和Cytochrome C影响不大。同时,益心解毒方与模型组和地高辛组相比,能增加Mdm2的表达,统计学有明显差异。结论：1.通过结合文献调查,HIT数据库,GenCLiP2.0分析软件对疾病中药靶点进行通路和靶点预测的分析方法证明了中药治疗心血管疾病的药理学机制与心肌细胞凋亡密切相关,并提示了其可能作用的途径及潜在药物靶标,这种方法为研究中药作用机制和信号转导途径提供了方向,在阐明中药多靶点药理学作用网络的研究中具有重要意义；也为中医药精确用药,中药复方组方,优化组方,老药新用等提供方向和理论支持。2.通过对益心解毒方全方和不含金银花的其他五味药在P53通路上的比对发现,金银花在P53通路上主要增加了对Mdm2蛋白的影响,P53能启动凋亡,而Mdm2能反馈抑制P53的表达,推测方中金银花通过介导Mdmm2抑制P53介导细胞凋亡,进而达到协同抗凋亡的药理学作用,进一步说明中药多靶点相互配伍提高药效的药理学作用,也为组方配伍提供理论依据,同时提供中药多组分,多靶点的网络药理学研究方法。3.益心解毒方对细胞凋亡有明显的抑制作用,通过靶点验证发现其在P53通路中主要通过抑制P53, Bax,Fas和Caspase3的表达抑制心肌细胞凋亡。同时,益心解毒方通过方中金银花作用于Mdm2干预P53途径,起到放大益心解毒方整方影响心力衰竭细胞凋亡的病理转归的作用。验证与预测结果相符。为配伍金银花增大药效提供证据,也为新药开发提供实验基础。