【摘 要】
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目的:探讨过表达CENPI基因对胃癌SGC7901细胞增殖、迁移、侵袭及细胞凋亡生物学行为的影响。方法:首先培养人胃癌SGC7901细胞株,用慢病毒转染技术构建CENPI基因空载体阴性对照组（Negative control,NC）和CENPI基因过表达组（Over expression,OE）。然后荧光显微镜下观察72小时的转染情况,并应用实时荧光定量聚合酶链式反应（QRT-PCR）检测细胞中C
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目的:探讨过表达CENPI基因对胃癌SGC7901细胞增殖、迁移、侵袭及细胞凋亡生物学行为的影响。方法:首先培养人胃癌SGC7901细胞株,用慢病毒转染技术构建CENPI基因空载体阴性对照组（Negative control,NC）和CENPI基因过表达组（Over expression,OE）。然后荧光显微镜下观察72小时的转染情况,并应用实时荧光定量聚合酶链式反应（QRT-PCR）检测细胞中CENPI m RNA相对表达水平。最后用MTS比色法（MTS assay）及平板克隆形成（colony formation）检测细胞增殖能力,划痕愈合（wound healing）及Transwell小室法（无基质胶）检测细胞迁移能力,Transwell小室法（有基质胶）检测细胞侵袭能力,并应用蛋白质印迹法（Western Blot）检测细胞中凋亡相关蛋白（PARP）相对表达水平。结果:1、慢病毒转染胃癌SGC7901细胞72小时后荧光表达丰度达90%以上。2、QRT-PCR统计结果显示,过表达组的CENPI m RNA表达水平显著高于对照组和未转染组（P＜0.001）,据此选定过表达组和对照组进行后续实验。3、MTS检测两组细胞24h,48h,72h,96h,120h的490nm处吸光度（OD值）,并据此计算出细胞增殖活性,统计结果显示72h到120h过表达组细胞增殖活性显著高于对照组（P＜0.001）;并且平板克隆形成集落数目统计结果显示,过表达组细胞克隆形成集落数目远多于对照组（P＜0.001）。4、统计分析划痕愈合实验24h及48h两组细胞的迁移率,结果显示过表达组细胞迁移率明显高于对照组（P＜0.01）。5、统计分析Transwell小室迁移及侵袭细胞数量,结果显示过表达组的细胞迁移及侵袭数目远多于对照组（P＜0.001）。6、蛋白质印迹法（Western Blot）统计结果显示,过表达组细胞凋亡相关蛋白PARP相对表达量显著低于对照组（P＜0.001）。结论:过表达CENPI基因能促进胃癌SGC7901细胞增殖、迁移及侵袭,并可能抑制细胞凋亡。
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