青钱柳多糖CP50的筛选及降血糖活性研究

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本研究以青钱柳叶为原料,采用水提醇沉法提取青钱柳叶中的多糖,通过体外筛选和体内试验验证了多糖的降血糖活性,并对获得的多糖进行组分分析,旨在为青钱柳叶资源在功能食品方面的开发利用以及产业化发展提供一定的科学依据。主要内容和研究结果如下:(1)青钱柳粗多糖经纯化后得到精制多糖,精制多糖分级醇沉后得到4个醇沉组分,分别为CP50、CP60、CP70和CP80。以对α-葡萄糖苷酶的抑制作用研究精制多糖和分级醇沉组分的体外降血糖活性,以总抗氧化能力、清除DPPH自由基、(·OH)自由基能力和Fe2+螯合能力评价其体外抗氧化活性。青钱柳叶多糖各组分对α-葡萄糖苷酶均有一定的抑制作用,且呈现一定的剂量-效应关系,不同醇沉多糖组分中,CP50对α-葡萄糖苷酶的抑制作用最强;青钱柳多糖各组分均具有一定的体外抗氧化能力,不同醇沉组分清除DPPH自由基能力以及总抗氧化能力由强到弱依次为:CP50、CP60、CP70、CP80,而清除(·OH)自由基能力以及对Fe2+螯合能力的强弱正好相反。青钱柳叶中含有的多糖组分具有良好的体外降血糖和抗氧化活性,可进一步加工利用。(2)通过化学成分分析测定得到纯化后多糖CP50样品中多糖含量、蛋白含量和糖醛酸含量分别为85.37 g/100 g、8.16 g/100 g和16.23 g/100 g。通过氨基酸组成分析、矿物质元素分析、分子量测定、单糖组成分析对CP50的进行了组分分析。结果表明CP50中含量最高的三种氨基酸依次为谷氨酸、蛋氨酸和天冬氨酸。CP50中大量元素镁和钾的含量较高。微量元素中锰的含量最高,硒的含量最低。多糖CP50的重均分子量大小为85.6 k Da。CP50由5种单糖组成,分别为鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖,对应的摩尔比为7.21:7.11:11.94:229.56:34.56,其中葡萄糖的含量最高。(3)以链脲佐霉素诱导正常小鼠,建立STZ糖尿病小鼠模型,研究CP50的体内降血糖活性。试验过程中主要测定了糖尿病小鼠的血糖值、体质指数、免疫器官湿重以及胰岛组织细胞的形态学变化等指标。降血糖试验表明青钱柳叶多糖CP50各剂量组能够显著降低糖尿病小鼠的血糖值,保护小鼠免疫器官,增加小鼠肾脏、脾脏和肾脏的湿重,对肝脏无显著影响;CP50能够促进受的损胰岛细胞恢复,促进胰岛素的分泌;CP50对糖尿病小鼠的体重变化无明显作用,与模型组相比,无统计学差异。糖耐量试验表明青钱柳叶多糖CP50能够增加正常小鼠对葡萄糖的耐受力,高剂量组作用效果与阳性药物二甲双胍相当。
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