第一部分:D-半乳糖听觉中枢拟老化大鼠模型的建立　　 目的：利用D-半乳糖来建立中枢性老年性聋的动物模型，为中枢听觉系统老化机制的研究提供有效简便的途径。　　 方法：用5％ D-半乳糖（150mg/kg）对雄性SD大鼠进行每日颈背部皮下注射，共8周，以同等剂量生理盐水每日颈背部皮下注射作为对照组，HE染色和尼氏染色观察听皮层、下丘及耳蜗核的形态学改变，Taqman探针实时荧光定量多聚酶链反应 (reAltime qPCR) 检测线粒体DNA 4834 bp大片段缺失率。　　 结果：模型组大鼠听皮层、下丘及耳蜗核神经元数目（分别为322.58±35.25，344.08±40.50，207.33±22.01/mm2）比对照组（278.13±41.67，292.83±43.91，145.41±25.07/μm2）显著减少 (p<0.05)，并出现细胞排列紊乱，层次不清，胞浆尼氏体减少，可见较多胞质浓染的缺血神经元，间质结构疏松，胶质细胞增生，毛细血管增生、扩张，并出现较多病理性形态改变，如迂曲、扭曲、球形及线形改变。 模型组听皮层、下丘、耳蜗核的线粒体DNA 4834 bp缺失率 (16.22±1.29％，21.56±4.57％，13.96±2.47％) 比对照组 (11.24±1.09％，10.01±0.98％，8.78±0.94％) 显著升高 (p<0.05)。　　 结论：D-半乳糖可引起大鼠中枢听觉通路上的老化改变。　　 第二部分 听觉中枢的年龄相关性改变：D-半乳糖拟老化大鼠与自然衰老大鼠的比较。　　 目的：比较D-半乳糖拟老化大鼠和自然衰老大鼠听觉中枢的改变，并探讨其老化发生的机制。　　 方法：30只1月龄雄性SD大鼠随机分为两组：① D-半乳糖组 (15只)：以5％ D-半乳糖 (150mg/kg) 每日颈背部皮下注射，共8周；②对照组 (15只)：同等剂量生理盐水，每日颈背部皮下注射，共8周。 另取22-24月龄同品系大鼠 (15只)作为自然老化组。造模完毕后，每只动物检测听性脑干反应 （auditory brainstem response, ABR）和中潜伏期电位 （middle latency response，MLR）；实时荧光定量PCR检测听皮层、下丘、蜗核的线粒体DNA 4834 bp缺失率；硫代戊巴比妥法检测丙二醛 （MDA）的含量；光镜和透射电镜下观察各部位的病理学变化；TUNEL （terminAldeoxynucleotidyltransferase-mediated UTP nick-end labeling） 法检测各部位细胞的凋亡情况。　　 结果：与对照组相比，自然老化组大鼠ABR阈值提高，各波潜伏期、I-IV波间期及MLR Pa潜伏期均延长，而 D-半乳糖组ABR 阈值无改变，III, IV, V波潜伏期和I-IV波间期延长，Pa波潜伏期延长，Ⅰ，Ⅱ波潜伏期虽有延长趋势，但无统计学差异；两组老化大鼠听皮层、下丘、蜗核中MDA含量以及线粒体DNA 4834 bp缺失率比对照组显著升高，凋亡细胞数增加，并出现细胞结构排列紊乱，神经元胞浆中脂褐素增多，线粒体肿胀，内质网扩张，呈广泛空泡化改变，有髓神经纤维分离、断裂等退行性改变。　　 结论：①年龄相关性中枢听觉功能障碍以及退行性改变存在于D-半乳糖拟老化大鼠和自然老化大鼠中。②氧化应激、mtDNA大片段缺失以及凋亡参与了中枢听觉系统的老化过程。　　 第三部分 D-半乳糖衰老模型大鼠听觉中枢线粒体DNA缺失及其修复酶的变化　　 目的：探讨线粒体DNA损伤发生的机制及碱基切除修复系统在听觉中枢老化中的作用。　　 方法：48只雄性SD大鼠随机分为4组：D-半乳糖低、中、高剂量组和生理盐水对照组，分别于每日皮下注射5％D-半乳糖150、300、500mg/kg和等体积生理盐水，共8周。采用实时荧光定量PCR和western blot方法检测各组大鼠听皮层、下丘和耳蜗核中线粒体DNA 4834 bp缺失率以及DNA修复酶8-氧鸟嘌呤糖苷酶 (8-oxoguanine DNA glycosylase, OGG1)和DNA聚合酶γ (DNA polymerase γ, DNA pol γ)的基因和蛋白水平的变化；JC-1荧光探针法检测各部位的线粒体膜电位。　　 结果：与对照组相比，三组D-gal组听皮层、下丘及蜗核中线粒体DNA 4834 bp缺失率明显增高 (p<0.05)，高剂量D-gal组升高最明显；而OGG1和pol γ的基因和蛋白表达水平均明显降低 (p<0.05)，并随D-gal剂量增大而降低，同时线粒体膜电位也有所降低 (p<0.05)。　　 结论：在听觉高级中枢老化的过程中线粒体DNA损伤可能是由于其修复功能减退造成的。