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抗生素的过度使用导致细菌耐药性和药物残留等问题,危害人类健康。因此,寻找抗生素的替代物对畜牧业发展具有重要意义。乳酸芽孢杆菌具有乳酸菌和芽孢杆菌的双重特性,产乳酸的同时还有抗逆性强、耐高温、易储存等特点,比乳酸菌更适于在畜牧业中推广应用。本试验以仔猪粪便及植物根部土壤为材料,分离乳酸芽孢杆菌,并对分离得到的菌株进行一系列的特性研究,为乳酸芽孢杆菌制剂应用于实际生产提供一定的理论依据。具体结论如下:本实验采用普通营养培养基从菌源中分离得到26株革兰氏阳性、有芽孢的乳酸细菌。首先对分离到的26株菌进行抑菌性能试验:筛选出对仔猪黄白痢病源菌有较强抑制作用的15株菌;其次,采用pH1.8的培养液处理培养了72h的15株菌的菌液2h,经体外耐酸试验筛选,得出8株菌,此条件下表现出良好耐受性且具有较高的活性;最后,在0.3%胆盐浓度的液体培养基中处理2h,筛选出活菌数及存活率较高的菌株Y4、Y6、Y13、Y16。将目的菌株接种在普通营养培养基上37℃培养24h,观察其特征,且在相差显微镜下观察其形态特征为:细胞呈杆状,且形成端生椭圆形芽孢,芽孢囊不明显膨大,接触酶阳性,初步确认4株菌属于芽孢杆菌属;然后,通过生理生化试验初步确定Y4、Y6、Y13、Y16菌株属于乳酸芽孢杆菌。其中,Y4、Y6是从仔猪粪便中分离得到,初步确认为凝结芽孢杆菌,Y13、Y16是东北农业大学大学土壤中分离,初步确认为嗜热脂肪芽孢杆菌。实验二,将目的菌株Y4、Y6、Y13、Y16及市售枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌的产消化酶及产酸能力对照,结果表明:α-淀粉酶产量由低至高为:Y16<Y13<枯草芽孢杆菌<Y4<地衣芽孢杆菌<Y6(47.99U/mL);碱性蛋白酶产量由低至高为:Y16<地衣芽孢杆菌<Y13<Y4<Y6<枯草芽孢杆菌(43.3U/mL);中性蛋白酶产量由低至高为:Y16<Y4<Y13<地衣芽孢杆菌<Y6<枯草芽孢杆菌(27.07U/mL)。各菌株的VFA产量由低至高为:Y13<枯草芽孢杆菌<Y4<地衣芽孢杆菌<Y16<Y6(259.48mmol/L)。实验三,通过测定4株目的菌株混合培养的生长曲线得知乳酸芽孢杆菌的生长稳定期即活菌数峰值出现在30小时,芽孢数峰值出现在36小时;通过液体发酵试验得出液体培养基配方为:80目豆粕粉1.0%,80目麦麸粉1.0%,80目玉米粉1.0%,葡萄糖1.0%,CaC030.3%, K2HP040.2%,MnS04·H2O0.002%, MgS04·7H2O0.01%,NaCl0.1%,H2O100ML.在此培养基组成下进行发酵,发酵液活菌数可达1.95×1012cfu/mL。实验四,益生菌制剂的制备过程中,50℃低温烘干乳酸芽孢杆菌制剂所得有效活菌数最多;此外,各类菌制剂的载体成分及适宜比例为稻壳:豆粕=1:3;通过保质期测定(即益生菌制剂中的有效活菌数)得出真空包装菌制剂的180d有效活菌数,显著高于非真空包装的有效活菌数。