【摘 要】
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伊氏锥虫病,是由伊氏锥虫(Trypanosomaevansi)寄生在马属动物、牛、骆驼等家畜血液内引起的一种血液原虫病,对畜牧业造成较大危害。由于锥虫抗原变异的原因,近年来疫苗研究转向
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伊氏锥虫病,是由伊氏锥虫(Trypanosomaevansi)寄生在马属动物、牛、骆驼等家畜血液内引起的一种血液原虫病,对畜牧业造成较大危害。由于锥虫抗原变异的原因,近年来疫苗研究转向用锥虫不变成分作为潜在对象,由于膜下微管结合蛋白p15在锥虫研究中表明具有很好的免疫原性,且已证明用微管结合蛋白p15天然蛋白和重组蛋白作为疫苗,在布氏锥虫(Trypanosomabrucei)上获得了很高的保护率。
锥虫膜下微管结合蛋白p15在种间具有保守性,本研究根据报道的布氏锥虫微管结合蛋白p15(Tb-MAPp15)基因及其3非翻译区保守序列设计引物,采用PCR法从伊氏锥虫云南水牛株基因组DNA中首次扩增得到伊氏锥虫微管结合蛋白p15(Te-MAPp15)基因。成功构建重组原核表达载体和真核表达载体,并制备亚单位疫苗和核酸疫苗。
分别用制备的重组亚单位疫苗,核酸疫苗以及核酸疫苗-重组亚单位疫苗联合使用免疫小鼠。免疫后攻虫,进行抗体水平、NO浓度及疫苗保护效果检测,重组蛋白抗体水平和NO浓度最高,虽然核酸疫苗-重组亚单位疫苗联合使用免疫产生的抗体水平和NO浓度低于重组蛋白疫苗免疫组,但后者免疫小鼠存活时间最长,可能是由于核酸疫苗首先激发机体的细胞免疫,然后蛋白激发体液免疫,更利于机体清除虫体,表明后者可能是锥虫免疫防治的一个新方法。
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