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[目的]:观察以健脾为基础的复方及方中健脾药物组分和非健脾药物成分对人胃癌MKN-45皮下移植瘤裸小鼠肿瘤生长、肿瘤细胞凋亡及非特异性免疫的影响,以探讨复方中的不同药物组分对于上述作用的具体作用及机理。
[方法]:将BALb/c nu/nu裸小鼠通过皮下种植制成人胃癌MKN-45皮下移植瘤模型。随机分为复方全方组、复方健脾中药组、复方非健脾中药组、SFU化疗组和生理盐水组。观察不同干预方法对皮下移植瘤裸小鼠肿瘤生长作用的影响;通过TUNEL法测定肿瘤细胞凋亡指数,观察不同干预方法对皮下移植瘤肿瘤细胞凋亡的影响;通过LDH法测定皮下移植瘤裸小鼠脾NK细胞杀伤活性、ELISA法测定血清IFN-γ含量、western-blot方法测定脾细胞NKG2D受体表达,观察不同干预方法对于MKN-45皮下移植瘤小鼠非特异性免疫的影响。
[结果]:
1.全方两次抑瘤率分别为34.4%和23.68%,健脾组两次抑瘤率分别为30.69%和28.32%,非健脾组两次抑瘤率分别为26.98%和38.28%。全方组平均瘤重均低于生理盐水组瘤重,差异具有统计学意义(实验一P=0.000、实验二P=0.007),健脾组平均瘤重均低于生理盐水组瘤重,差异具有统计学意义(实验一P=0.000、实验二P=0.002),非健脾组平均瘤重均低于生理盐水组瘤重,差异具有统计学意义(实验一、实验二P=0.000);全方组与健脾组瘤重相比,差异无统计学意义(实验一P=0.590,实验二P=0.604),全方组与非健脾组平均瘤重相比,差异无统计学意义(实验一P=0.285,实验二P=0.106),健脾组与非健脾组平均瘤重相比,差异无统计学意义(实验一P=0.590,实验二P=0.284)。
2.全方组、健脾组凋亡指数均高于生理盐水组瘤重,差异具有统计学意义(P=0.018),非健脾组凋亡指数高于生理盐水组,差异具有统计学意义(P=0.03);全方组与健脾组相比,差异无统计学意义(P=0.879),全方组与非健脾组相比,差异无统计学意义(P=0.414),健脾组与非健脾组相比,差异无统计学意义(P=0.529)。
3.(1)全方组、健脾组、非健脾组皮下移植瘤裸小鼠脾NK细胞杀伤活性均高于生理盐水组,差异具有统计学意义(P=0.000);全方组、健脾组、正常对照组裸小鼠脾NK细胞杀伤功能均高于非健脾组,差异具有统计学意义(P=0.000),全方组低于正常对照组,差异具有统计学意义(P=0.004),健脾组低于正常对照组,差异有统计学意义(P=0.039),全方组和健脾组相比,差异无统计学意义(P=0.374)。
(2)全方组、健脾组、非健脾组、正常对照组裸小鼠血清IFN-γ含量均高于生理盐水组,差异具有统计学意义(P=0.000);全方组与正常对照组相比,差异无统计学意义(P=0.545),健脾组与正常对照组相比,差异无统计学意义(P=0.056),全方组与健脾组相比,差异无统计学意义(P=0.150),非健脾组裸小鼠血清IFN-γ含量低于全方组、健脾组、正常对照组,差异具有统计学意义(P=0.000)。
(3)全方组、健脾组皮下移植瘤小鼠脾细胞NKG2D受体表达均高于生理盐水组,差异具有统计学意义(P=0.000),非健脾组高于生理盐水组,差异具有统计学意义(P=0.004),正常对照组高于生理盐水组,差异具有统计学意义(P=0.001);全方组与正常对照组相比,差异无统计学意义(P=0.068),健脾组与正常对照组相比,差异无统计学意义(P=0.058),非健脾组与正常对照组相比,差异无统计学意义(P=0.514),非健脾组低于全方组,差异有统计学意义(P=0.016),非健脾组低于健脾组,差异有统计学意义(P=0.013)。
[结论]:
(1)以健脾为基础的复方及其方中健脾和非健脾组分均具有抑制人胃癌MKN-45皮下移植瘤生长的作用。
(2)以健脾为基础的复方及其方中健脾和非健脾组分均具有促进人胃癌MKN-45皮下移植瘤肿瘤细胞凋亡的作用。
(3)以健脾为基础的复方及其方中健脾和非健脾组分均具有上调人胃癌MKN-45皮下移植瘤裸小鼠NK细胞杀伤活性、血清IFN-γ含量及脾细胞NK细胞增强型受体NKG2D的表达作用,健脾组分在全方的此类作用中起到主要作用。