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目的:研究Ⅰ类整合子与革兰阴性菌多重耐药的关系,探索整合子可变区的长度对Ⅰ类整合酶基因(intI1)表达水平的影响,通过质粒消除试验比较三种不同的质粒消除方法的有效性及其对整合酶表达的影响,探讨整合子中整合酶表达的部分调控机制。 方法:床收集铜绿假单胞菌87株和大肠埃希菌101株,采用K-B法测定各菌株对抗生素的耐药性;将25株Ⅰ类整合子阳性铜绿假单胞菌按可变区的长度分为2组,用实时荧光定量PCR法测定2组细菌intI1 mRNA的相对表达量并比较2组细菌的耐药性;分别用紫外线、SDS和盐酸小檗碱对3株整合子位于质粒上的大肠埃希菌进行消除,比较消除效果及intI1表达量的改变。 结果:在铜绿假单胞菌和大肠埃希菌中,Ⅰ类整合子阳性菌株的多重耐药率高于阴性菌株;Ⅰ类整合子阳性的铜绿假单胞菌中,短可变区组的细菌耐药性较长可变区组细菌弱,短可变区组整合酶表达水平较高,而长可变区组整合酶表达水平较低,提示可交区长度可能影响整合酶基因的表达水平;三种消除方法相比,SDS对大肠埃希菌质粒的消除作用最好,盐酸小檗碱次之,紫外线最弱;经过紫外线和盐酸小檗碱的消除作用,大肠埃希菌质粒上整合酶的基因表达上调,SDS消除后,质粒上整合酶的基因表达下调,但下调程度不大。 结论:在铜绿假单胞菌和大肠埃希菌中,Ⅰ类整合子与多重耐药性密切相关;整合酶表达水平与整合子可变区的长度具有相关性;不同的质粒消除方法对整合酶表达的调控也不同。