原花青素对氨基脲染毒小鼠肝肾损伤的影响

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目的:1、观察原花青素(PC)对氨基脲(SEM)染毒小鼠肝肾损伤的影响及添加原花青素前后效果对比;2、探讨原花青素(PC)对氨基脲(SEM)染毒小鼠肝肾损伤的的保护机制,为原花青素进一步开发利用提供理论依据。方法:80只清洁级健康成年昆明种(KM)小鼠,雌雄各半,随机分为8组:溶剂对照组、SEM染毒组、SEM染毒+低剂量PC保护组、SEM染毒+中剂量PC保护组、SEM染毒+高剂量PC保护组、低剂量PC保护+SEM染毒组、中剂量PC保护+SEM染毒组、高剂量PC保护+SEM染毒组;溶剂对照组灌胃去离子水,每天一次,连续6周;SEM染毒组,前2周灌胃56.25 mg/kg·bwSEM溶液,后4周灌胃去离子水;SEM染毒后加低、中、高剂量PC保护组,前2周均灌胃56.25 mg/kg·bwSEM溶液,后4周分别灌胃100mg/kg·bw、200mg/kg·bw、400mg/kg·bwPC溶液;低、中、高剂量PC保护后加SEM染毒组,前4周分别灌胃100mg/kg·bw、200mg/kg·bw、400mg/kg·bwPC溶液,后2周灌胃56.25 mg/kg·bwSEM溶液;以上各组溶液均用去离子水作溶剂,灌胃体积为10ml/kg·bw,试验期间连续灌胃,每日一次。末次灌胃24h后,眼眶静脉丛取血后处死小鼠,取肝脏、肾脏计算其脏器系数;常规病理学切片,HE染色观察肝脏和肾脏组织形态学变化;全自动生化分析仪检测血清ALT、AST、GGT、UREA、CRE、UA的含量;制备肝脏和肾脏匀浆,采用试剂盒测定MDA、GSH含量和SOD、GSH-PX活性。结果:1、SEM染毒组小鼠体重增长低于溶剂对照组(P<0.05);低、中、高剂量PC后保护组小鼠体重增长高于SEM染毒组(P>0.05);中、高剂量PC前保护组小鼠体重高于同剂量PC后保护组,其差别有统计学意义(P<0.05);2、SEM染毒组小鼠肝、肾脏器系数高于溶剂对照组(P<0.05);中、高剂量PC后保护组小鼠肝脏脏器系数低于SEM染毒组(P<0.05);高剂量PC后保护组小鼠肾脏脏器系数低于SEM染毒组(P<0.05);中、高剂量PC前保护组小鼠肝脏、肾脏脏器系数均低于同剂量PC后保护组,差异有统计学意义(P<0.05);3、肝、肾组织病理形态学观察:肝组织形态学改变:SEM染毒组,肝细胞变性坏死严重,肝索排列紊乱,胞浆疏松化和气球样变并伴有大量炎性细胞浸润;PC后保护组,肝脏组织形态较SEM染毒组有所改善,肝细胞变性坏死程度明显减轻;PC前保护保护组随PC剂量的增加,肝细胞坏死、脂肪变性、细胞水肿及炎性浸润等病理变化明显改善。肾组织形态学改变:SEM染毒组,可见系膜细胞中、重度增生,系膜区增宽,肾小管内出现蛋白管型,肾小管上皮细胞呈玻璃样变性,并见大量巨噬细胞浸润;PC后保护组,肾组织形态特点较SEM染毒组有所改善,肾小管上皮细胞变性坏死程度明显减轻;PC前保护组,随着PC剂量的增加,肾小球坏死、肾小管上皮细胞变性及炎性浸润等病理改变明显改善,仅见部分炎症细胞浸润。4、SEM染毒组小鼠血清ALT、AST、GGT含量高于溶剂对照组(P<0.05);中、高剂量PC后保护组小鼠血清ALT、AST、GGT含量低于SEM染毒组(P<0.05);中、高剂量PC前保护组小鼠血清ALT、AST、GGT水平低于同剂量PC后保护组,差别有统计学意义(P<0.05)。5、SEM染毒组小鼠血清UREA、CRE、UA含量高于溶剂对照组(P<0.05),中、高剂量PC后保护组小鼠血清UREA、CRE、UA含量低于SEM染毒组(P<0.05);中、高剂量PC后保护组小鼠血清UREA、CRE、UA含量低于同剂量PC后保护组,差别有统计学意义(P<0.05)。6、SEM染毒组小鼠肝脏SOD活性、MDA含量高于溶剂对照组(P<0.05);中、高剂量PC后保护组与SEM染毒组比,小鼠肝脏SOD活性升高,MDA含量降低(P<0.05);中、高剂量PC前保护组小鼠血清SOD活性升高,MDA含量降低与同剂量PC后保护组比较(P<0.05);与溶剂对照组比较SEM染毒组小鼠肝组织GSH含量升高,GSH-Px活力下降(P<0.05);与SEM染毒组比,中、高剂量PC后保护组小鼠肝组织匀浆中的GSH含量降低,GSH-Px活力升高(P<0.05);中、高剂量PC前保护组与同剂量PC后保护组相比小鼠肝组织GSH含量降低,GSH-Px活力升高,差异有统计学意义(P<0.05)。7、与溶剂对照组比,SEM染毒组小鼠肾脏SOD、GSH-Px活性下降、GSH、MDA增高(P<0.05);与SEM染毒组比,中、高剂量PC后保护组肾脏GSH-Px、SOD活性升高,GSH、MDA含量降低(P<0.05);中、高剂量PC前保护组与同剂量PC后保护组比,GSH-Px、SOD活性升高,GSH、MDA含量下降,差异有统计学意义(P<0.05),结论:1.一定剂量(56.25 mg/kg·bw )氨基脲对昆明种小鼠肝肾具有亚慢性毒性作用;2. 200-400mg/kg·bw原花青素对氨基脲引起的小鼠肝肾损伤有保护作用,染毒前添加原花青素保护作用更好。3.抗氧化损伤是原花青素对氨基脲染毒小鼠肝肾损伤的保护机制之一。
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