鲍曼不动杆菌生物膜形成与群体感应及外排泵的相关性研究

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细菌耐药已经成为世界性问题,细菌耐药造成大量医疗资源消耗,导致感染病死率上升。世界卫生组织报告,耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌(CRAB)是医院感染最主要及细菌耐药现状最严重的菌种,CRAB多呈泛耐药、全耐药,其耐药机制全面且复杂。碳青霉烯类抗生素耐药性的增加限制了临床治疗的选择范围,临床面临无药可用的严峻形势。收集了我院117株CRAB及碳青霉烯类敏感鲍曼不动杆菌(CSAB)的临床数据进行分析,对AB耐药机制中外排泵、群体感应系统(QS)、生物膜的相互作用机制进一步研究。1.鲍曼不动杆菌(AB)临床数据分析方法:收集2019年3月至2021年9月我院各科室送检的117株AB,筛选CRAB及CSAB菌株临床数据。结果:1.40位CRAB菌株感染患者,重症监护病房(ICU)是CRAB分布的主要区域占比为62.5%,年龄大于或等于60岁人数占62%,机械通气患者占71%,40株CRAB呈多耐药。2.20位CSAB菌株感染患者,ICU是CSAB分布的主要区域占比为36.4%,年龄大于或等于60岁人数占61%,机械通气患者占55%,20株CSAB对常用抗生素均表现为敏感。2.CRAB耐药机制中外排泵、群体感应系统、生物膜作用机制研究方法:PCR扩增CRAB及CSAB两组菌株中群体感应基因Aba I、Aba R及外排泵Ade G基因,研究两组间阳性率是否存在差异;根据药敏结果分为喹诺酮类敏感及耐药组,研究Ade G基因在两组间阳性率是否存在差异;根据药敏结果分为碳青霉烯类敏感及耐药组,研究Ade G基因在两组间阳性率是否存在差异;倒置显微镜下观察AB生物膜的形成,RT-PCR检测Aba I、Aba R及外排泵Ade G基因在浮游态和生物膜态下基因表达量的差异。结果:1.CSAB组中Aba I基因阳性率为40%(8/20),Aba R为45%(9/20),ade G为85%(17/20)。2.CRAB组中Aba I基因阳性率为70%(28/40),Aba R为75%(30/40),ade G为95%(38/40)。3.60株菌中环丙沙星耐药为(41/60),其中ade G基因表达阳性(38/41);左氧氟沙星耐药为(38/60),ade G基因表达阳性(37/38);美罗培南耐药(40/60),ade G基因表达阳性(38/40);亚胺培南耐药(40/60),ade G基因表达阳性(38/40)。4.生物膜态Aba I基因的表达量是浮游态的1.6倍。生物膜态Aba R基因的表达量是浮游态的1.9倍。结论:1.我院CRAB呈多耐药、泛耐药,主要分布于ICU,要加强抗生素管理及院感防控。2.Aba I、Aba R基因与CRAB耐药相关。3.ade G基因与喹诺酮类抗生素耐药存在明显相关性。4.72小时内96孔板培养生物膜随培养时间的延长而增多。5.群体感应系统在AB生物膜形成过程中发挥着重要作用。
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