黑刺菝葜为百合科菝葜属中药材,临床上多用其根茎入药,研究发现其根茎提取物中富含多种甾体皂苷,其具有多样的药理活性和生物效应,如:促进种子萌发,提高幼苗光合速率和水分利用率,增强植物抗盐、抗旱和抗虫等抗逆生理效应。因此怎样简单、有效的从黑刺菝葜中提取得到更多的甾体皂苷成为研究的热点。本文从建立和优化总皂苷制备工艺的目标出发,星点设计-效应面法优化法黑刺菝葜中总皂苷的比色法工艺研究;星点设计-效应面法优化黑刺菝葜中总皂苷的提取工艺;大孔树脂分离纯化黑刺菝葜中总皂苷的工艺研究;黑刺菝葜总皂苷的提取及初步纯化试验研究。主要试验结果如下:1.采用星点设计-效应面法对黑刺菝葜中总甾体皂苷的比色法进行了优化研究,得出了最佳比色条件,即样品挥干,加入4.8%茴香醛无水乙醇溶液2.1 mL,100℃水浴10 min,显色反应时间10 min,显色剂用量2.1 mL。2.采用星点设计-效应面法和单因素试验相结合优化了黑刺菝葜中总皂苷的提取工艺,得出了最佳提取工艺,确定了最佳显色条件是乙醇浓度64%,提取时间为92min,料液比为1:8。3.研究大孔吸附树脂纯化黑刺菝葜中总皂苷的最佳工艺条件。本文对3种不同大孔吸附树脂对黑刺菝葜总皂苷的吸附及洗脱性能进行了考察,并以洗脱后总皂苷含量为指标,对最佳树脂吸附洗脱工艺条件进行了筛选。筛选出SP-825型树脂为纯化效果最佳树脂,最适宜进样速度与质量浓度分别为2 BV/h和2.50mg/mL。洗脱时洗脱剂乙醇的最适宜体积分数与洗脱剂用量分别50%和5BV。4.用优化的总皂苷提取工艺对黑刺菝葜根粉进行了提取,浸膏经石油醚、乙酸乙酯、正丁醇依次萃取,正丁醇部分又经过大孔树脂的初步纯化,95%乙醇的洗脱部分经一次硅胶柱分离纯化,部分组分再经过反复重结晶,所得重结晶纯度较高。该法操作简单,得到的总皂苷纯度较高,为黑刺菝葜中总皂苷的工业化生产提供一条有效的制备方法。