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【目的】 细胞色素C（cytochrome，CytC）是一种可诱导肿瘤细胞凋亡的蛋白质。然而，外源性的CytC因其结构的特异性，难以进入细胞，影响其在肿瘤治疗中的效果。因此，本研究采用原位聚合法和聚乙二醇（polyethyleneglycol，PEG）表面修饰，制备基于CytC的pH响应性蛋白凝胶（命名为nCytC-bPEG），通过考察其稳定性、药物释放、细胞摄取和细胞活性等方面的特性，探讨其体外释放行为。 【方法】 1.采用原位聚合法和PEG表面修饰制备nCytC-bPEG，并使用琼脂糖凝胶电泳、动态光散射仪（dynamiclightscattering，DLS）和透射电子显微镜（scanningtransmissionelectronmicroscopy，TEM）对其进行表征。 2.考察nCytC-bPEG的体外稳定性及其在pH7.4和pH6.5条件下的药物释放情况。 3.以HepG2细胞系为实验细胞，考察FITC-nCytC-bPEG在pH7.4和pH6.5条件下的细胞摄取情况。 4.以HepG2细胞系为实验细胞，采用MTT法检测nCytC-bPEG在pH7.4和pH6.5条件下的细胞活性。 【结果】 1.琼脂糖凝胶电泳和DLS的结果表明，nCytC-bPEG在pH7.4时不带电，在pH6.5时带正电，nCytC-bPEG具有pH响应性。从TEM图可看出，nCytC-bPEG的粒径约为25nm。 2.体外稳定性试验表明15天后nCytC-bPEG在含有或不含有胎牛血清（fetalcalfserum，FBS）的磷酸缓冲盐溶液（sphosphatebuffersaline，PBS）中的粒径大小变化不大。体外药物释放曲线可知，12h后，nCytC-bPEG在pH6.5+2mM谷胱甘肽（glutathione，GSH）和pH6.5+10mMGSH下的药物释放率分别达到（64.3±5.3）%和（78.4±4.3）%。 3.定性和定量的细胞摄取试验均表明nCytC-bPEG的肿瘤微环境响应性释放，其在pH6.4条件下能通过细胞膜，在pH7.4条件下不能进入细胞。 4.细胞活性试验表明nCytC-bPEG具有抗肿瘤作用。在pH6.4条件下，加入100μg/mLnCytC-bPEG72h后，HepG2细胞的存活率为（15.2±1.3）%。 【结论】 nCytC-bPEG良好稳定性和pH响应性，使其在正常组织中能稳定存在，减少副作用，在酸性的肿瘤环境下能进入肿瘤细胞。nCytC-bPEG进入肿瘤细胞后，会在含有大量GSH的细胞液内释放出CytC，从而诱导肿瘤细胞凋亡。因此，nCytC-bPEG不仅能选择性地进入肿瘤细胞，还具有良好的抗肿瘤作用。