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目的通过电针刺激足三里、阿是穴干预新西兰兔腓肠肌急性钝器伤后的修复过程,观察电针对受损骨骼肌形态、运动终板标志物AChE和AChR表达的影响,研究电针刺激足三里+阿是穴治疗急性骨骼肌损伤后运动终板修复情况,初步探讨电针治疗骨骼肌损伤后的修复机制。方法将45只成年新西兰兔(雌雄不限,体重:2.0-2.5kg)制作右后肢腓肠肌重度钝器伤模型,随机分为模型组、电针组、阳性对照组(IGF-1),每组15只动物。于造模后24h开始治疗,模型组自然愈合;电针组足三里穴取在健侧,正极针直刺入足三里穴15mm,负极针在足三里旁开5mm处斜刺入皮下;阿是穴分别取在距打击部位远、近端各lOmm处,直刺15mm,接正负极;电针参数:频率2Hz,0.4mA,时间15min,隔日1次,直至取材前一天结束治疗;阳性对照组于造模后24h在造模区肌肉注射0.1mg/ml IGF-1,0.25ml/只,每周治疗一次。各组动物分别于造模后7d、14d、28d取材,每个时间点取5只。HE染色观察肌纤维的一般情况,用GENMED冰冻切片乙酰胆碱酯酶活性染色试剂盒观察AchE的表达情况,荧光染色法观察AChR的表达情况。结果1.不同时间点各组腓肠肌HE染色观察结果骨骼肌损伤后7天模型组肌纤维大量坏死、降解,结构破坏,肌细胞核排列紊乱,可见大量炎性细胞侵润。电针组,肌细胞核内移,核增多,排列紊乱,可见新生肌纤维生成。阳性对照组新生肌纤维较模型组为多,肌纤维宽大,细胞核蓝色深染,排列紊乱。骨骼肌损伤后14天模型组可见较少新生肌纤维,炎性细胞大量侵润,结缔组织增生,骨骼肌细胞核蓝色深染,排列紊乱。电针组新生肌纤维明显增多,肌细胞核开始较规律排列于肌纤维两侧。阳性对照组肌纤维较模型组宽大,肌细胞核,排列较为规则,可见结缔组织增生。骨骼肌损伤后28天模型组肌纤维排列紊乱,可见新生肌纤维,可见大量结缔组织。电针组仍可见大量新生肌纤维生成,肌细胞核大量生成,可见结缔组织生成。阳性对照组肌纤维排列整齐,肌细胞核较规律排列于肌纤维周围,可见较少结缔组织。2.不同时间点各组腓肠肌AChE和AChR表达情况2.1骨骼肌损伤后,随着时间的延长(7d、14d、28d),各组运动终板处AchE的表达呈上升趋势;其中各时间点运动终板的直径、面积、AChE累积光密度(IOD),阳性对照组(IGF-1)均高于电针组(P<00.05),电针组均高于模型组(P<0.05),各组间差异具有统计学意义。(如图6、7、8)2.2骨骼肌损伤后(7d、14d、28d),各组运动终板处AChR的表达呈上升趋势;其中各时间点AChR表达的直径、面积、累积光密度(IOD),阳性对照组(IGF-I)均高于电针组(P<0.05),电针组高于模型组(P<0.05),各组间差异具有统计学意义。(如图10、11、12)结论1.电针刺激有利于促进受损骨骼肌运动终板的修复,其可能与电针上调AChE和AChR表达有关。2.电针有助于受损区域运动终板AChE和AChR的表达,也可能是其促进运动终板修复及骨骼肌再生的机制之一,但其具体机制有待于进一步研究。