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目的:以沉香茶为对象,考察其主要成分的提取分离工艺进行,探索沉香茶保护DNA氧化损伤的活性及作用机制,并对其保护DNA氧化损伤的活性成分进行研究。 方法:沉香茶的的提取及芫花素的分离:以甲醇为溶剂,采用索式提取器提取12 h,将滤液减压蒸馏得到流浸膏。乙酸乙酯萃取,萃取液减压浓缩至恒重,再通过多次硅胶柱层析,分离纯化得到芫花素,并用HPLC等现代仪器对化合物结构进行鉴定和含量测定。沉香茶保护DNA氧化损伤活性的研究:以沉香茶对?OH所致DNA损伤修复的作用,来表征沉香茶修复保护DNA氧化损伤活性。沉香茶保护DNA氧化损伤活性的机制研究:研究沉香茶保护DNA氧化损伤的机制主要通过研究沉香茶抗氧化活性来进行。主要指标有DPPH?,ABTS+?,?O2-,?OH,还原能力(Fe3+和Cu2+),脂质过氧化,金属络合能力(Fe2+和Cu2+)。沉香茶保护DNA氧化损伤活性的主要有效成分研究:以没食子酸为标准品,采用福林试剂法测定沉香茶甲醇提取物中多酚含量;以芦丁为标准品,采用硝酸铝-亚硝酸钠-氢氧化钠法测定沉香茶甲醇提取物中总黄酮含量;反相高效液相法定性测定沉香茶中主要的黄酮类成分,并采用DPPH?,ABTS+?,?O2-,还原能力(Fe3+和Cu2+),金属络合能力(Fe2+和Cu2+)法,研究沉香茶中主要有效成分的活性。 结果:采用甲醇提取,结合硅胶柱层析分离纯化得到的单体化合物,经HPLC鉴定,证明为芫花素,外观性状,溶解性都与文献报道相符,沉香茶甲醇提取物中芫花素含量达到6.89±0.08 mg/g。沉香茶对于DNA体内氧化损伤的保护作用呈现出量效关系, IC50值为1.07±0.10 mg/mL,这表示沉香茶对于DNA体内氧化损伤具有非常有效的修复作用。沉香茶有保护DNA氧化损伤的活性,主要通过清除体系中的自由基、络合体系中的过渡金属离子这两种途径实现的。沉香茶抗氧化的物质基础是多酚(157.41±6.51 mg GAE/g)中的黄酮(150.80±4.79 mg/g)类成分,芫花素是沉香茶中含量最大的黄酮,而木犀草素是最主要的抗氧化有效成分。 结论:沉香茶具有保护DNA氧化损伤的活性,这种活性主要通过清除体系中的自由基、络合体系中的过渡金属离子这两种途径实现的;而自由基清除又是通过供氢原子或供电子实现的。沉香茶的这种作用主要来自于内含的黄酮,尤其是木犀草素。