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目的:检测胃癌患者Th17主要转录因子与Treg细胞特异性转录因子及Th17/Treg相关的细胞因子的表达水平,分析Th17/Treg在胃癌患者的变化情况,观察其与临床病理组织分型之间的关系,并初步探讨其可能机制。方法:1)分离健康志愿者外周血单个核细胞(PBMC),PMA+Ionomycin刺激培养6h,采用PCR扩增目的基因序列,T-A克隆,构建目的基因定量PCR检测用质粒标准品。2)70例胃癌患者,40例健康志愿者外周血标本均来自江苏大学附属医院-镇江市第一人民医院,所有患者标本均记录了性别、年龄、肿瘤大小、位置、病理组织分型资料。采用实时荧光定量聚合酶链反应(QRT-PCR)技术,检测PBMC中Th17细胞主要转录因子RORγt,Treg细胞特异性转录因子FoxP3及Th17/Treg细胞相关细胞因子IL-17、IL-6、IL-1β、TGF-βmRNA的表达水平;3)采用直线相关分析方法对FoxP3与RORγt、TGF-βmRNA表达水平进行相关性分析;4)采用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测胃癌患者血浆IL-23、IL-10浓度。结果:1.转录因子分析结果1)与健康对照组比较,胃癌患者组PBMC中Th17细胞的主要转录因子RORγt mRNA表达水平,Treg细胞的特异性转录因子FoxP3mRNA表达水平均显著升高(P＜0.05);2) FoxP3 mRNA与RORγt mRNA表达水平的比值,在胃癌转移组较健康组明显升高,差异具有统计学意义(P＜0.05),而胃癌未转移组与健康组相比无明显差异(P＞0.05)。3) FoxP3 mRNA与RORγt mRNA表达水平的比值与胃癌病理组织分型的关系显示,在低分化组比值明显升高,有统计学意义(P＜0.05)4)相关性分析表明,胃癌转移组患者FoxP3与RORγt mRNA表达水平无明显相关性(R~2=0.1520)。2.相关细胞因子的分析1)与健康对照组比较,胃癌患者组外周血单个核细胞(PBMC)中Th17细胞相关的细胞因子IL-17、IL-6、IL-1βmRNA表达水平明显升高(P＜0.05),Treg细胞相关的细胞因子TGF-βmRNA表达水平显著升高(P＜0.05);在胃癌患者,转移组TGF-βmRNA较未转移组明显升高(P＜0.05),而IL-17、IL-6、IL-1βmRNA表达水平在两组间未见明显差异(P＞0.05)。2) Th17/Treg细胞因子与临床病理组织分型的关系显示:TGF-βmRNA在低分化组呈高水平表达(P＜0.05),而IL-17、IL-6、IL-1βmRNA在各分化组表达水平无明显差异(P＞0.05)。3) TGF-βmRNA与FoxP3 mRNA表达呈明显正相关(R~2=6861)。4) ELISA检测结果显示,胃癌患者血浆IL-23、IL-10呈高表达,与健康对照组差异明显(P＜0.05);并且IL-10 mRNA表达水平胃癌未转移组与转移组之间差异显著(P＜0.01);而IL-23在两组间无明显差异(P＞0.05)。结论:1)胃癌患者PBMC中存在Th17细胞和Treg细胞的高表达。2)晚期胃癌患者FoxP3与RORγt mRNA的比值升高,提示Treg强势表达,Th17相对弱势,这一失衡在肿瘤恶性分化的患者更为明显。3) Th17/Treg细胞在胃癌的表达可能与二者在肿瘤免疫内环境相关的细胞因子调节有关。