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目的:本实验旨在探讨快速老化痴呆小鼠( Senescence accelerated dementia mouse/prone, SAMP8)的听功能、智力及耳蜗( Cochlea)组织中 MeCP2表达的增龄性变化特点。 方法:选用5、7月龄的 SAMP8小鼠作为实验组,同龄的抗快速老化小鼠亚系1( Senescence accelerated mouse/resistance1,SAMR1)作为对照组。分别对各组小鼠采用 Y型电迷宫及8kHz短纯音听性脑干反应( auditory brainstem response,ABR)检测其智力、双耳听功能( ABR阈值)、耳蜗基底膜铺片硝酸银染色毛细胞计数计算左侧耳蜗底回外毛细胞平均缺失率、应用免疫组织化学染色技术检测不同月龄组小鼠右侧耳蜗中组织中 MeCP2蛋白的表达与分布情况。 结果:1、智力检测:实验组5月龄 SAMP8小鼠第一天的学习成绩(达标次数、错误次数、全天总反应时间)分别为:8.57±5.97(次)、3.43±1.13(次)、48.47±15.82(s);实验组5月龄 SAMP8小鼠第二天的记忆成绩(达标次数、错误次数、全天总反应时间)分别为:5.14±3.33(次)、2.71±0.76(次)、46.19±11.63(s)。实验组7月龄 SAMP8小鼠第一天的学习成绩(达标次数、错误次数、全天总反应时间)分别为:15.3±6.58(次)、5.20±1.03(次)、73.09±22.56(s);实验组7月龄 SAMP8小鼠第二天的记忆成绩(达标次数、错误次数、全天总反应时间)分别为:11.2±2.39(次)、3.60±0.84(次)、60.05±12.85(s)。对照组5月龄SAMR1小鼠第一天的学习成绩(达标次数、错误次数、全天总反应时间)分别为:7.29±2.29(次)、1.57±0.53(次)、46.87±11.44(s)。对照组5月龄SAMR1小鼠第二天的记忆成绩(达标次数、错误次数、全天总反应时间)分别为:3.57±1.51(次)、0.86±0.38(次)、35.16±7.51(s)。对照组7月龄SAMR1小鼠第一天的学习成绩(达标次数、错误次数、全天总反应时间)分别为:8.17±2.99(次)、2.83±1.17(次)、52.57±13.79(s)。对照组7月龄SAMR1小鼠第二天的记忆成绩(达标次数、错误次数、全天总反应时间)分别为:7.67±2.50(次)、1.83±0.75(次)、44.28±11.31(s)。组间比较,实验组7月龄SAMP8小鼠与对照组7月龄SAMR1小鼠相比达标次数和错误次数增多,全天总反应时间延长,差异显著(P<0.05);组内比较,实验组7月龄SAMP8小鼠较5月龄SAMP8小鼠达标次数和错误次数增多,全天总反应时间延长,差异显著(P<0.05)。 2、听功能检测:实验组5、7月龄SAMP8小鼠的左耳ABR阈值( dB SPL)分别为49.3±3.59、55.1±5.09;对照组5、7月龄SAMR1小鼠的左耳ABR阈值( dB SPL)分别为34.5±5.58、46.7±5.47。实验组5、7月龄SAMP8小鼠的右耳ABR阈值( dB SPL)分别为46.1±3.53、56.3±6.17;对照组5、7月龄SAMR1小鼠的右耳ABR阈值( dB SPL)分别为37.5±6.72、47.3±2.07。组间比较,实验组7月龄SAMP8小鼠与对照组7月龄SAMR1小鼠双耳ABR阈值差异显著(P<0.01);实验组5月龄SAMP8小鼠与对照组5月龄SAMR1小鼠双耳ABR阈值差异显著(P<0.01);组内比较,实验组5、7月龄SAMP8小鼠双耳ABR阈值差异显著(P<0.05)。 3、耳蜗毛细胞改变:耳蜗基底膜铺片光学显微镜下观察,与对照组比较,随着月龄的增加,实验组 SAMP8小鼠耳蜗底回外毛细胞缺失加重;各组小鼠耳蜗底回外毛细胞平均缺失率(％)分别为:5月龄实验组SAMP8小鼠2.4±1.73、5月龄对照组 SAMR1小鼠1.53±1.21;7月龄实验组 SAMP8小鼠12.8±3.63、7月龄对照组SAMR1小鼠2.51±2.2。组间比较,实验组7月龄SAMP8小鼠与对照组7月龄SAMR1小鼠耳蜗底回外毛细胞平均缺失率差异显著(P<0.01);组内比较,实验组5、7月龄SAMP8小鼠耳蜗底回外毛细胞平均缺失率差异显著(P<0.01)。 4、耳蜗 MeCP2免疫组化染色:耳蜗 MeCP2免疫组化染色镜下观察,与对照组比较,随着月龄的增加,实验组SAMP8小鼠耳蜗 MeCP2免疫组化染色平均光密度值降低;各组小鼠耳蜗 MeCP2免疫组化染色平均光密度值分别为:5月龄实验组 SAMP8小鼠38.43±12.37、5月龄对照组 SAMR1小鼠43.11±10.18;7月龄实验组SAMP8小鼠27.26±4.61、7月龄对照组SAMR1小鼠42.23±9.37。组间比较,实验组7月龄SAMP8小鼠与对照组7月龄SAMR1小鼠相比,耳蜗 MeCP2免疫组化染色平均光密度值明显降低,差异显著(P<0.01);组内比较,实验组7月龄SAMP8小鼠较5月龄SAMP8小鼠耳蜗 MeCP2免疫组化染色平均光密度值降低,差异显著(P<0.05)。 耳蜗螺旋神经节细胞内 MeCP2免疫组化染色平均光密度值分别为:5月龄实验组SAMP8小鼠35.69±2.36、5月龄对照组SAMR1小鼠42.91±5.87;7月龄实验组SAMP8小鼠30.26±3.54、7月龄对照组SAMR1小鼠40.78±4.27。组间比较,实验组7月龄SAMP8小鼠与对照组7月龄SAMR1小鼠相比,耳蜗 SGNs MeCP2免疫组化染色平均光密度值明显降低,差异显著(P<0.01);实验组5月龄 SAMP8小鼠与对照组相比,耳蜗 SGNs MeCP2免疫组化染色平均光密度值降低,差异显著( P<0.05)。组内比较,实验组7月龄SAMP8小鼠较5月龄SAMP8小鼠耳蜗 SGNs MeCP2免疫组化染色平均光密度值降低,差异显著(P<0.05)。 结论:SAMP8小鼠随月龄增长出现学习和记忆力下降以及听功能减退、耳蜗毛细胞缺失加重以及耳蜗 MeCP2免疫组化染色阳性率降低等觉系统退行性变化特征;具有听觉系统退行性变化特征的快速老化痴呆小鼠 SAMP8可以用来作为研究老年性耳聋与老年性痴呆之间是否有关联的动物模型。