本实验室前期发现重组制备的融合表达的C1ql1和C1ql4球状结构域蛋白(g C1ql1和g C1ql4)能够促进大鼠心脏微血管内皮细胞的管状结构形成及细胞迁移,且在此过程中ERK1/2的磷酸化被激活。为了进一步明确g C1ql1和g C1ql4促进血管新生的作用及调控机制,人脐带静脉内皮细胞和鸡胚卵黄囊膜模型被用为两种新的血管新生模型探索g C1ql1和g C1ql4对血管新生的作用;ERK1/2信号通路上游分子MEK抑制剂U0126也用于探索ERK1/2信号通路对g C1ql1和g C1ql4促进的血管新生调控;基于基因表达谱芯片和Realtime PCR技术对g C1ql1和g C1ql4蛋白促进心脏微血管内皮细胞血管新生的下游效应基因进行了分析。缺氧是一种常见的导致血管内皮损伤的病理因素,可通过损伤内皮结构和功能引发多种心血管疾病。积极改善缺氧损伤导致的血管内皮功能受损对防止心血管疾病具有重要意义。在本研究中我们也采用流式细胞术结合CCK8细胞活性对g C1ql1对心脏微血管内皮损伤作用进行了初步探讨。通过细胞划痕实验和Matrigel成管实验发现,重组制备的C1ql1和C1ql4球状结构域蛋白以剂量及时间依赖效应促进人脐带静脉内皮细胞的管状结构形成及迁移,对鸡胚卵黄囊膜血管的新生具有促进影响。Western blot显示人脐带静脉内皮细胞和心脏微血管内皮细胞经g C1ql1和g C1ql4处理后ERK1/2磷酸化被激活,U0126可以抑制g C1ql1和g C1ql4诱导的人脐带静脉内皮细胞和心脏微血管内皮细胞迁移及管状形成。利用基因表达谱芯片和实时定量PCR技术分析发现心脏微血管内皮细胞经g C1ql1和g C1ql4处理后,促血管新生相关因子VEGF、GDF15、PGDF、NOS2、CYP7B1及ENGL3等基因均有不同程度表达上调。使用流式细胞术分析发现预处理g C1ql1蛋白能够缓解由缺氧诱导的CMEC细胞凋亡;CCK8细胞活性测定进一步发现经g C1ql1预处理后,缺氧导致的CMECs细胞活性降低得到了抑制,暗示g C1ql1蛋白对心脏微血管内皮损伤具有一定的保护作用。