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前言胃癌(gastric carcinoma)是最常见的恶性肿瘤之一,严重地威胁着人类健康。随着胃癌发病机理研究的深入,已发现胃癌的发生、发展与胃癌细胞凋亡密切相关。目前,关于胃癌细胞凋亡及其调节机制的研究已成为人们关注的热点之一。本研究应用免疫组化SP法检测Survivin和Caspase-3在72例胃癌及54例癌旁的正常组织的表达情况,初步探讨Survivin和Caspase-3在胃癌的发生、发展中的作用以及二者的表达与细胞凋亡的关系。实验方法收集中国医科大学附属第一医院2007年1月-6月临床及病理资料完整的手术切除并经病理证实的胃癌肿瘤外科标本72例及距胃癌组织5cm以远的正常组织54例。所有患者在施行手术之前未接受任何放疗、化疗或其他针对胃癌的治疗。采用免疫组织化学法(SP法三步法)检测上述胃癌及癌旁组织中Survivin和Caspase-3的表达。用SPSS 11.5软件包统计分析结果。实验结果一、Survivin在胃癌及癌旁组织中的表达胃癌和癌旁组织中Survivin蛋白的表达率差异显著(P<0.01), Survivin的表达与淋巴结转移和临床分期明显相关,有淋巴结转移者明显高于无淋巴结转移者(P<0.05)；临床分期Ⅲ-Ⅳ期者明显高于Ⅰ-Ⅱ期者(P<0.05)。二、Caspase-3在胃癌及癌旁组织中的表达Caspase-3蛋白在胃癌和癌旁组织中的阳性表达率有显著性差异(P<0.01),与组织分化程度和临床分期有相关性,分化较好组明显高于分化较差组(P<0.05),临床分期为Ⅰ-Ⅱ期的表达水平明显高于Ⅲ-Ⅳ期者(P<0.05)。三、Survivin、Caspase-3表达的相关性胃癌组织中Survivin和Caspase-3的表达呈负相关。讨论Survivin基因是于1997年由耶鲁大学的Altieri等用效应细胞蛋白酶受体-1(effecter cell protease receptor-1, EPR-1) cDNA作探针,从人类基因组P1文库中通过杂交筛选获得,是IAP家族中最小的成员。与IAPs家族其他成员不同,Survivin在人体内几乎所有的恶性肿瘤中均有表达,而在正常分化的成人组织中(除子宫内膜、胎盘和胸腺组织外)无表达。研究发现,Survinin与恶性肿瘤的发生发展关系密切,Survivin不仅通过与微管蛋白形成复合物来直接抑制末端Caspase-3、Caspase-7等凋亡蛋白酶的活性,从而抑制凋亡,同时具有抑制凋亡效应蛋白酶Caspase活性、参与细胞周期调控及调节细胞有丝分裂等多种生物学作用。本研究结果显示,Survivin在胃癌组织中的阳性表达率明显高于癌旁组织中的阳性表达率。研究表明,Survivin的表达与多种肿瘤的生物学特性和(或)疾病分期有关。本实验发现,Survivin的表达与淋巴结转移、TNM分期相关,检测胃癌组织中Survivin的表达可能对判断胃癌的恶性程度、病情进展及预后有一定的价值。Caspase家族(cysteinyl aspeantate-specific proteinase family)是指一群含有半胱氨酸的蛋白酶,介导即将死亡的细胞高效而特异的蛋白水解作用,在细胞凋亡的启动和完成中起重要作用,是细胞凋亡的执行者,决定了细胞凋亡的形态改变和生物化学改变。Caspase-3是该家族的重要成员之一,是细胞凋亡的关键执行者。Caspase-3在肿瘤中的表达不仅存在组织特异性,在不同肿瘤组织演进过程中所起的作用也不相同。Zapa JM等发现Caspase-3参与了乳腺癌的浸润。本实验结果表明,Caspase-3蛋白表达与组织分化程度相关,Caspase-3在癌旁组织中有极高的阳性表达率,而在胃癌组织中表达率明显下降,表明Caspase-3的表达缺失在胃癌的发生过程中起重要作用。Caspase-3的阳性表达也与胃癌的去分化密切相关,胃癌中Caspase-3阳性表达率在分化较好组明显高于分化较差组。Caspase-3的阳性表达与临床分期相关,临床分期为Ⅰ-Ⅱ期的表达水平明显高于Ⅲ-Ⅳ期者,但与肿瘤浸润深度、淋巴结转移等影响肿瘤恶性程度及发展趋势的指标无明显相关性,说明其在判断肿瘤恶性进展及预后方面有一定的意义。以往的研究证实,Survivin可通过直接抑制凋亡通路下游蛋白酶Caspase-3和Caspase-7发挥抗凋亡作用,Survivin还通过与纺锤体纤维结合,间接抑制Caspase对纺锤体的水解作用。本研究的相关性分析发现,胃癌组织中Caspase-3表达与Survivin呈负相关,说明胃癌组织中Survivin在抑制Caspase-3的活性方面起着一定的作用。结论1、Survivin在胃癌中为高表达,Caspase-3在癌旁组织中为高表达,在胃癌的发生中起着重要作用。2、Survivin蛋白在胃癌中的异常表达与淋巴结转移和临床分期明显相关。3、Caspase-3蛋白在胃癌中的异常表达与组织分化程度和临床分期明显相关4、胃癌组织中Survivin和Caspase-3的表达呈负相关。