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第一节超声破坏微泡造影剂对大鼠心肌组织的影响目的:探索超声破坏微泡对大鼠心肌组织结构的影响并选择其最佳作用条件。方法:20只成年Wistar大鼠,经尾静脉注射微泡造影剂1ml,超声频率300kHz,按超声作用剂量随机分为4组,即分别以0.5W/cm2(A组)、1.0 W/cm2 (B组)、2.0 W/cm2 (C组)、2.5 W/cm2(D组)经大鼠胸壁辐照心肌中微泡2min。光镜及透射电镜下观察大鼠心肌组织结构变化。结果:光镜下,A组未见充血和红细胞漏出;B组心肌组织充血和红细胞漏出较A组轻;C组和D组可见心肌组织充血明显,大量红细胞漏出。电镜观察,A、B、C组未见心肌组织超微结构改变。D组心肌纤维明显断裂、融解,细胞器肿胀。结论:不同声强超声破坏微泡造影剂作用于大鼠心肌,可引起不同程度的炎症反应。以2.5 W/cm2及2.0 W/cm2最为显著。2.5 W/cm2可引起心肌超微结构改变。2.0 W/cm2及2.0 W/cm2以下则无超微结构改变。故2.0 W/cm2声强为最佳安全治疗剂量。第二节超声破坏微泡造影剂促进正常大鼠心肌血管新生的研究目的:探讨超声破坏微泡能否刺激大鼠心肌内源性VEGF分泌及促进大鼠血管新生。方法:正常成年Wistar大鼠36只随机分为3组。A组为超声破坏微泡组,B组为单纯超声辐照组,C组为对照组。A组经尾静脉注射微泡1.0ml,以300kHz、2.0W/cm2超声间歇辐照心肌中微泡2min,B组用同样剂量超声辐照心肌2min,C组仅注射生理盐水1.0ml作为对照。每组均分别进行3次处理,每2天处理一次。第一次处理3天后每组各取3只大鼠断颈处死后取其心肌,常规HE染色光镜观察心肌结构变化。剩余大鼠于2周后取材,免疫组化检测心肌组织中VEGF、CD34表达。结果:HE染色结果显示, A组心包膜充血、水肿、出血、炎症细胞浸润;心肌局部组织明显出血、充血、炎症细胞浸润;未见心肌细胞坏死及心肌纤维断裂融解。B组心肌组织见轻度充血、出血,炎症细胞浸润不明显;未见心肌纤维损伤。C组无充血、出血、水肿及心肌纤维损伤。免疫组化结果显示,超声破坏微泡组心肌组织中见大量VEGF和CD34表达,新生血管较多。单纯超声组心肌组织中有较少VEGF和CD34表达,新生血管较少。对照组仅有极少量VEGF和CD34表达,未见明显新生血管。结论:超声破坏微泡可刺激心肌内源性VEGF分泌,促进血管新生。第三节超声破坏微泡造影剂促进心肌梗死大鼠缺血心肌血管新生的研究目的:探讨超声破坏微泡促进大鼠缺血心肌内源性VEGF分泌及其治疗大鼠心肌梗死的可行性。方法:正常成年Wistar大鼠40只,建立心肌梗死模型。随机分为4组。A组为超声破坏微泡组;B组为单纯超声辐照组;C组为单纯微泡注射组;超声能量、辐照时间、微泡剂量同第二部分。D组手术组( D组尾静脉注射1ml生理盐水作为对照)。各组均分别进行3次处理,每2天处理一次, 4周后取材,免疫组化检测心肌组织中CD45、VEGF、CD34表达; ELISA及Western blot检测VEGF的表达。结果:A组心肌组织中见大量VEGF和CD34、CD45表达,新生血管较多。B组心肌组织中有较少VEGF和CD34、CD45表达,新生血管较少。C组及D组仅有极少量VEGF和CD34表达,新生血管很少。ELISA检测显示以超声破坏微泡组VEGF的表达量最高。Western blot检测显示,超声破坏微泡组可见21kD左右大小的蛋白质条带。其余三组分别见同样大小的弱的蛋白质条带。结论:超声破坏微泡可刺激心肌内源性VEGF分泌,促进缺血心肌血管新生。