1800MHz EMR对细胞的损伤及与v-onc联合对细胞转化的影响

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电磁辐射对机体是否会有影响引起了越来越多的关注。引起机体内活性氧升高是有害环境因素致机体损伤的主要机制,活性氧能诱导氧化应激反应,促使机体老化或引起肿瘤等慢性疾病。本实验室前期工作已经表明电磁辐射会导致小鼠成纤维细胞内活性氧含量升高,在此基础上,本实验继续采用1800MHz电磁场对小鼠皮肤细胞进行暴露的方式,进一步研究了短期电磁辐射对线粒体功能,脂质、DNA氧化损伤,细胞凋亡等的影响。具体结果如下:辐照20 min,80 min,120 min后细胞内活性氧均有显著升高(p<0.05),且加入·OH选择性中和剂富氢水后,活性氧含量有所降低,推测EMR引发的活性氧种类多为·OH;脂质过氧化标志物丙二醛含量在辐照120min后显著升高(p<0.05);辐照3h和4h后线粒体膜电位下降(p<0.05);辐照3h和4h后细胞早期凋亡率显著增加,辐照2h、4h和5h后晚期凋亡率显著性增加(p<0.05);随着辐照时间的延长,DNA氧化损伤标志物8-OHdG的水平呈现逐渐递增的趋势,辐照2h,3h,4h后8-OHdG水平较假暴露组均显著增加(p<0.05)。以上结果提示,电磁辐射会造成细胞的氧化损伤。  弱致癌因素导致癌症的发生是一个长期积累的过程,且在复杂的生活环境当中,往往是复杂的环境因素联合作用,才导致癌症的发生。因此电磁辐射因素与病毒癌基因联合,将可以加速癌症发生的进程,缩短观察周期。90%以上的成年人都是EBV的携带者,EBV是公认的肿瘤相关病毒。鉴于此,本研究构建了EBV-lmp1的真核表达载体,并筛选出了稳定表达LMP1的细胞株。在1800MHz/2W/kg下进行电磁辐射暴露,通过血清依赖实验,细胞克隆形成实验检测细胞转化情况。实验结果显示EMR+/lmp1+组细胞较EMR+/lmp1-、EMR-/lmp1+、和EMR-/lmp1-三组细胞,血清依赖性更低,克隆形成能力增强。表明,EMR与lmp1联合作用于细胞后,细胞增加了恶性转化的趋势。EMR诱导细胞转化的分子机制将进一步研究。
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