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目的: 舌缺损动力性恢复是目前舌缺损修复面临的一个难题,腹直肌腹膜瓣携带多单元神经单位及腹膜等对于舌缺损修复有着其他皮瓣不可替代的优势,本试验通过建立腹直肌-腹膜瓣移植,肋间神经与舌下神经吻合动物模型,观察腹直肌-腹膜瓣自体舌移植后腹膜粘膜化的过程,舌下神经运动纤维的数量,肋间神经与舌下神经吻合后肋间神经运动纤维再生的数量及直径改变及CNTF(睫状神经生长因子)对肋间神经和舌下神经再生的影响。为今后临床各种肌瓣修复舌缺损后,肌肉和神经功能的恢复提供了新的研究视角和实验平台。 方法: (1)将18只雄性比格犬随机分为3组,每组6只,分别制备腹直肌-腹膜瓣修复舌缺损的动物模型,右侧为正常对照,左侧为术侧。术后12周进行行为学观察及HE染色观察肌细胞变化。 (2)三组动物模型于建模后12周分别行大体观察,肌电检测及HE、NADH、SDH酶染色,评价舌体功能恢复和肌肉功能重构。 (3)三组动物模型于建模后12周,观察吻合段神经大体直径变化,神经电生理检测观察舌下神经再支配情况,HE、AchE染色测量运动神经再生数量,直径、髓鞘厚度,免疫组织化学染色CD56和S100检测神经再生表达。 结果: 第一部分:术后第12周,三组动物舌体术区愈合良好,腹膜粘膜化,左侧舌缘术区见粘膜部分瘢痕,舌体运动自如,精神状态良好,能正常进食、水。A、B、C组三组体重组间比较差异无统计学意义。A、C与B、C组间进食、水比较差异有统计学意义(P<0.05),A、B组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。腹膜手术缝合时呈浅白色,移植入口腔后5天左右逐渐变成粉红色,并逐渐变薄,4周时明显粘膜化,8周时与舌粘膜已无明显差别。 第二部分:术后第12周A、B两组吻合神经的转移腹直肌腹膜瓣面积差异无统计学意义(P>0.05),与C组未行神经吻合比较差异有统计学差异(P<0.05),吻合神经的A、B组术后12周肌瓣面积大于未吻合的C组,说明吻合神经后可减少肌瓣萎缩。A、B比较,两组肌纤维类型中Ⅰ型肌纤维的比例差异无统计学意义(P=0.107),Ⅱ型肌纤维在各组中所占比例差异无统计学意义(P=0.105)。A、B两组中腹直肌肌纤维神经吻合后与正常腹直肌比较,Ⅰ、Ⅱ型肌纤维各自所占比例已发生改变。 第三部分:术后第12周A、B两组神经纤维计数比较差异有统计学意义(P=0.000),两组运动神经数量比较差异有统计学意义(P=0.000),A、B两组舌下神经传导速度比较(P=0.001),差异有统计学意义,A组舌下神经传导速度大于B组舌下神经传导速度。A、B两组吻合神经的CD56和S100染色均见阳性表达,A组阳性率高于 B组。 结论: (1)本课题首次采用犬为实验动物建立腹直肌-腹膜瓣舌缺损修复动物模型,探讨模型制作的具体步骤和手术方法,观察到实验动物中雌性犬腹壁下动脉出现解剖变异。明确犬腹直肌-腹膜瓣修复舌缺损修复模型的可行性。 (2)组织学观察发现受舌下神经再支配后肌纤维类型组成较正常腹直肌-腹膜瓣相比发生了明显改变。不带神经组移植腹直肌-腹膜瓣术后12周肌瓣萎缩严重,肌细胞变小、萎缩,被大量脂肪组织替代,占据了部分肌纤维间隙,I型和II型肌纤维不能明确分辨。神经吻合组中,肌细胞结构排列有序,细胞结构完整,II型肌纤维比例减少,II型肌纤维向I型转化,失神经骨骼肌重新获得神经再支配。 (3)肋间神经与舌下神经吻合,神经纤维可再生,舌下神经功能可部分恢复。